链霉亲和素(SA)简述:
链霉亲和素(SA)是Streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远比亲和素低。
链霉亲和素(SA)的来源:
SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物,主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯,1L培养液中含蛋白10~60mg。链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合。
链霉亲和素(SA)的应用:
enzyme immunoassays, 酶免疫测定
immunohistochemistry, 免疫组织化学
flow cytometry, 流式细胞仪
Western blot, 原位杂交
immunoblotting procedures免疫印迹程序
Western blot免疫印迹
链霉亲和素(SA)的荧光标记物及激发波长:
荧光染料 | 颜色 | Ex(nm) | Em(nm) |
FITC | 绿色 | 490 | 525 |
TRITC | 黄色 | 547 | 572 |
Cy3 | 黄色 | 555 | 570 |
Cy5 | 红色 | 646 | 620 |
Cy7 | 深红色 | 750 | 773 |
Streptavidin-FITC
Streptavidin-TRITC
Streptavidin-CY5
Streptavidin-CY3
Streptavidin-thiol
FITC-BSA
TRITC-BSA
BAS-CY5
BAS-CY3
BAS-Biotin
Concanavalin A-CY5
Concanavalin A-CY3
Concanavalin A-CY5.5
Concanavalin A-FITC
Concanavalin A-Biotin
Concanavalin A-SH
Concanavalin A-TRITC
荧光标记的链霉亲和素(SA)的介绍:
FITC-Streptavidin:
FITC是使用的荧光基团,但其缺点是淬灭快,使用抗淬灭剂可以减轻。
花青染料(Cy2,Cy3,Cy5,Cy7-Streptavidin):
Cy2比FITC更稳定,且在表面荧光显微镜下,Cy2的荧光FITC更强。Cy3和Cy5比大多数荧光基团更亮,更稳定。二者常在共聚焦显微实验中作多标记。但Cy5的缺点是不能用表面荧光显微镜观察,因此通常用具有远红外检测器的共聚焦显微镜观察。
TRITC-Streptavidin:
TRITC,RRX,TR:TRITC经常和FITC一起用于双标记实验中,也可以使用RRX或TR,在使用装有氪氢灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记实验时,RRX尤其有用,可以和Cy2(或FITC)及Cy5一起使用,因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间,且和这两者的重叠很少。
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以上资料来自小编zhn2020.11.19