同位素标记红细胞来源的外泌体模拟研究
外泌体是天然的纳米尺寸的膜囊泡,由于它们作为**递送载体的潜力而引起了研究人员的兴趣。虽然外泌体是**的**载体,但它们的产生和体内生物分布仍未完全阐明。来自Kyungpook大学的研究人员分析了来自红细胞(RBC)的外泌体模拟物(exosome mimetics,EMs)的产生以及用于体内成像的放射性同位素标记RBC-EM。
来自RBC的工程化EM通过一步法大规模生产,并通过密度梯度离心进一步纯化。
RBC-EMs用锝-99m(99mTc)标记。
非侵入性成像,是在小鼠中注射99mTc(游离)或99mTc-RBC-EM,并通过γ相机成像分析它们的生物分布。然后处死动物,收集器官用于进一步的生物分布分析。 RBC-EM具有与RBC外泌体类似的特征,但就粒子数而言具有高于普通外泌体130倍的产率。 99mTc-RBC-Ems在两小时内的放射化学纯度几乎为100%,3小时降至97%。放射性标记不影响RBC-EM的大小和形态。与游离99mTc相比,99mTc-RBC-EMs在小鼠体内成像显示肝脏和脾脏中的摄取更高,并且甲状腺中没有摄取。离体成像也证实了体内的这些发现。此外,荧光成像证实了同位素成像结果。免疫荧光成像显示,RBC-EMs的肝摄取由库普弗细胞(驻留肝的巨噬细胞)**介导。
这些结果证明了用于新型RBC-EM的简单而大规模的生产方法,其可以用99mTc**地标记,并且通过同位素成像在体内可行地监测。 RBC-EM可用作体内**递送载体。
图:小鼠肝脏中RBC-EMs的荧光标记细胞的可视化。
(A)RBC-EMs DiD(红色)和CD68(绿色)在所述小鼠肝脏中的代表性共聚焦图像。(B)对来自PBS和RBC-EMsDiD注射的小鼠的肝脏的共聚焦图像中的CD68细胞的定量计数并以条形图表示。
(C)对从小鼠的肝脏中具有或不具有CD68(绿色)的RBC-EMsDiD(红色)的细胞共聚焦图像的定量进行计数并以条形图表示。
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