DCFH-DA(2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯)是一种常用的细胞活性氧(ROS)指示剂,具有细胞膜渗透性,本身无荧光,但进入细胞后能被细胞酯酶水解并氧化生成强荧光产物DCF,从而用于检测ROS的产生情况。
主要特点
细胞膜渗透性:易于渗透细胞膜,进入细胞内部。
无自发荧光:在细胞内不会自发发出荧光信号,避免了背景干扰。
对ROS敏感:只有在ROS存在时才会被氧化生成强荧光产物DCF。
工作原理
DCFH-DA进入细胞后,首先被细胞酯酶水解生成DCFH。在ROS存在的情况下,DCFH被氧化生成DCF,从而发出荧光信号。荧光信号的强度与ROS的水平成正比,因此可以通过检测荧光信号的强度来评估ROS的产生情况。
应用领域
医学领域:用于检测细胞内ROS的水平变化,判断氧化应激反应是否发生,并研究ROS与多种疾病之间的关系。
环境科学领域:检测环境中污染物对细胞内ROS水平的影响。
食品科学领域:检测食品中抗氧化剂的含量,评估食品的质量。
注意事项
DCFH-DA只能用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途。
在使用过程中需遵循产品说明书和安全操作规程,确保实验结果的准确性和可靠性。
DCFH-DA只能检测ROS的产生情况,不能对ROS进行定量分析。
DCFH-DA只能在活细胞中使用,不能在死亡或固定的细胞中使用。
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