2360411-64-7；Cyanine5 DBCO；DBCO-Cy5；叠氮化物反应探针-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

描述氰化物5 DBCO(DBCO-Cy5)是一种水溶性低毒叠氮化物反应探针(NIR荧光染料),用于通过无铜“点击”反应成像叠氮化物标记的生物分子。氰化物5 DBCO没有明显的细胞毒性或动物毒性,对靶细胞(叠氮标记细胞)以外的细胞生理功能没有损害。氰化物5 DBCO可用于标记和追踪体外和体内的细胞(Ex=635 nm,Em=650-700 nm)[1][2]。

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体外研究指南(以下是我们推荐的方案。该方案仅提供指南,应根据您的具体需要进行修改)。细胞标记(例如A549细胞)[1][2]：1.在2 mL培养基中,以3×104(因细胞而异)的密度将细胞接种到35 mm的玻璃底皿中。2.添加Ac4ManNAz(50µM,**浓度),孵育3天(在细胞表面生成叠氮基)。3.用DPBS(pH 7.4)清洗电池两次。4.用氰化物5 DBCO(20µM,**浓度)在37℃下培养细胞1小时。5.用DPBS(pH 7.4)冲洗细胞,并在25℃下用甲醛-戊二醛复合固定剂固定15分钟。6.用DPBS(pH 7.4)清洗细胞两次,并用DAPI染色细胞,以标记细胞核。7.使用共焦激光扫描显微镜测量氰化物5 DBCO荧光(Ex=635 nm,Em=650-700 nm)。注：1)用Ac4ManNAz治疗后,细胞表面人工引入的叠氮基团可被氰化物5 DBCO靶向3天以上。2) 氰化物5 DBCO标记的程度呈剂量依赖性。

体内研究指南(以下是我们推荐的方案。该方案仅提供指南,应根据您的具体需要进行修改)。体内细胞追踪[1][2]：1.在2 mL生长培养基中,以3×104(因细胞而异)的密度将细胞接种到35 mm玻璃底皿中。2.添加Ac4ManNAz(50µM,**浓度),孵育3天(在细胞表面生成叠氮基)。3.用DPBS(pH 7.4)清洗电池两次。4.对小鼠进行麻醉,然后将细胞(Ac4ManNAz治疗后)注入肝左叶。5.尾静脉注射青霉素5 DBCO(25µM,200µL)(肝细胞注射后3天)。6.测量氰化物5 DBCO荧光(Ex=635 nm,Em=650-700 nm)。利用体内成像系统获得体内近红外荧光(NIRF)图像。

参考文献

[1]. Kang SW, et al. Cell labeling and tracking method without distorted signals by phagocytosis of macrophages. Theranostics. 2014 Feb 12;4(4):420-31.

[2]. Zhu L, et al. Coupling Aptamer-based Protein Tagging with Metabolic Glycan Labeling for In Situ Visualization and Biological Function Study of Exosomal Protein-Specific Glycosylation. Angew Chem Int Ed Engl. 2021 Aug 9;60(33):18111-18115.

[3]. Song S, et al. In Situ One-Step Fluorescence Labeling Strategy of Exosomes via Bioorthogonal Click Chemistry for Real-Time Exosome Tracking In Vitro and In Vivo. Bioconjug Chem. 2020 May 20;31(5):1562-1574.

Cyanine5 DBCO物理化学性质

分子式 C53H59F6N4O2P

分子量 929.03

2360411-64-7；Cyanine5 DBCO；DBCO-Cy5；叠氮化物反应探针