在分子生物学和生物技术领域,荧光标记是一种常用的技术,用于检测和追踪生物分子如寡核苷酸和DNA。Cy3、Cy5和Cy7是三种常用的荧光染料,它们分别具有不同的发射波长和光谱特性,适用于不同的实验需求。此外,叠氮(N3)标记和Boc-hydrazide修饰也是常见的化学修饰方法,用于特定的生物分子标记和连接。
Cy3、Cy5、Cy7 标记寡核苷酸和DNA
Cy3 标记:
Cy3(Cyanine 3)是一种绿色荧光染料,其发射波长通常在560-580nm之间。Cy3标记的寡核苷酸和DNA在荧光显微镜、流式细胞术和荧光定量PCR等实验中广泛应用。通过化学方法(如固相合成法)将Cy3染料连接到寡核苷酸的5'端或3'端,可以实现对其的特异性标记。
Cy5 标记:
Cy5(Cyanine 5)是一种红色荧光染料,其发射波长通常在650-670nm之间。与Cy3相比,Cy5具有更长的发射波长,适用于需要减少背景荧光干扰的实验。Cy5标记的寡核苷酸和DNA常用于生物成像、基因表达分析和DNA测序等领域。
Cy7 标记:
Cy7(Cyanine 7)是一种近红外荧光染料,其发射波长通常在750-790nm之间。Cy7标记的寡核苷酸和DNA特别适用于深层组织成像和体内成像,因为近红外光在生物组织中的穿透能力较强,且背景荧光较低。
叠氮(N3)标记
叠氮(N3)基团是一种活泼的化学基团,常用于点击化学(Click Chemistry)中的铜催化叠氮-炔环加成反应(CuAAC)。通过叠氮标记寡核苷酸或DNA,可以方便地与其他含有炔基的分子进行连接,实现生物分子的特异性标记和组装。叠氮标记的寡核苷酸在生物传感器、药物递送系统和纳米材料构建等领域具有潜在应用。
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