水溶Cy5.5 NHS ester,也称为Sulfo-Cy5.5 NHS ester或Sulfo-Cy5.5 SE,是一种重要的荧光标记试剂,广泛应用于生物分子标记和成像研究中。以下是对该试剂的详细介绍:
一、基本概述
水溶Cy5.5 NHS ester是磺化远红色氰基5.5荧光团的胺反应活性酯,是Cy5.5的类似物。该试剂具有**的水溶性,能够在纯水环境中高效反应,避免了有机溶剂对生物样品的潜在损害。
二、特性与优势
荧光性能:
发出红色荧光,荧光量子产率高,使得标记后的生物分子在成像过程中具有更高的信噪比。
荧光发射波长位于远红外区域(Ex/Em:~678/695 nm),使得它在组织穿透能力和背景干扰方面具有优势。
水溶性:
能够在水溶液中进行高效的生物分子标记,无需添加任何有机助溶剂。
水溶性还使得试剂在生物体内的分布均匀,提高了标记效果。
反应活性:
适中的反应活性,能够在温和的条件下与生物分子上的氨基基团发生反应,生成稳定的共价键。
这种适中的反应活性使得试剂在标记过程中具有较低的背景干扰和较高的特异性。
细胞毒性:
具有较低的细胞毒性,可以在细胞培养和动物实验中安全使用。
较低的细胞毒性还使得试剂在长时间标记和追踪生物分子时具有更好的稳定性。
三、应用领域
水溶Cy5.5 NHS ester由于其独特的荧光性能、良好的水溶性、适中的反应活性以及较低的细胞毒性等特点,被广泛应用于以下领域:
荧光显微镜:用于生物分子的定位和定量分析。
流式细胞术:在细胞分选和细胞亚群分析中发挥重要作用。
酶联免疫吸附实验(ELISA):用于检测生物样品中的特定抗原或抗体。
生物传感器:构建基于荧光信号的生物传感器,用于检测生物分子或细胞活动。
四、储存与运输
储存:建议将水溶Cy5.5 NHS ester保存在-20°C避光干燥的条件下,以确保其稳定性和活性。水溶液的稳定性较弱,建议现配现用;DMSO溶液的稳定性相对较高,可置于-20°C避光保存,一般可稳定1个月。
运输:在室温条件下运输即可。
五、使用注意事项
为了保证实验的安全性和准确性,请穿戴实验服并佩戴一次性手套进行操作。
标记反应应在避光条件下进行,避免荧光团的光漂白现象。
在使用前,请确保试剂的质量和纯度符合实验要求。
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