名称:生物素标记牛血清白蛋白 Biotin-BSA
纯度:98%
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
储存时间:1年
保存:冷藏
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
生物素标记牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)是一种常用的生物化学技术,用于免疫学实验、分子探针、标记和检测等应用。生物素与BSA的标记通常是通过酯化、亲和力标记或直接化学反应实现的。以下是将生物素标记到BSA上的步骤和注意事项。
特性
生物素(Biotin): 一种小分子生物标记,用于与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)结合,广泛用于各种生物检测和分离技术。
牛血清白蛋白(BSA): 一种常用的蛋白质,作为稳定剂、载体蛋白或标准品在实验中使用。
合成步骤
1. 准备材料
生物素: 选择高纯度的生物素(可以选择生物素-NHS酯)。
牛血清白蛋白(BSA): 选择高纯度的BSA。
溶剂: 通常使用去离子水或适当的缓冲液(如PBS)。
2. 合成过程
溶解材料:
BSA: 溶解在去离子水或PBS中,通常浓度为1-10 mg/mL。
生物素: 如果使用生物素-NHS酯,溶解在适当的有机溶剂中(如DMSO),浓度通常为1-10 mg/mL。
反应:
反应条件: 将生物素-NHS酯溶液与BSA溶液混合。反应通常需要在适宜的pH值下(通常为7.5-8.5)进行。NHS酯会与BSA中的氨基酸残基(如赖氨酸)发生反应。
反应时间: 通常为1-2小时,具体时间取决于反应条件。
终止反应:
反应结束后,通过添加适当的终止剂(如甘氨酸)终止反应。
使用透析、离心或其他分离方法去除未反应的生物素和副产物。
纯化:
使用透析、凝胶过滤或其他方法纯化标记的BSA。
确认纯化后的生物素-BSA的纯度和标记效率。
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