革兰氏染液染色的步骤分析

其次介绍染色步骤：

1.涂片固定。

在干净的载玻片滴加一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。为避免因菌数过多聚集成团，不利于观察细菌个体形态，可在载玻片一侧进行上述操作，而在另一侧再加一滴水，从已涂布的菌液中再取一环于此水滴中进行稀释，涂布成薄层。若材料为液体培养物或固体培养物中洗下制备的菌液，则直接涂布于载玻片上即可，如菌液浓度较大，也可使用水滴再进行一次稀释。

涂片需要在室温条件下使其自然干燥，有时为了使之干得更快些，可将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯火焰上方较高的位置微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。

标本干燥后即进行固定，

固定常常利用高温，手执载玻片的一端(涂有标本的远端),标本向上，在酒精灯火焰外层尽快的来回通过3-4次，共约2s-3s,并不时以载玻片背面加热，载玻片背面触皮肤，以不觉过烫为宜(不超过60℃),待放置冷后，再进行染色。

2.染色。

在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液，染色液应完全覆盖整个菌膜，染色1min。

3.水洗。

染色到一定的时间，拿住玻片使之成450角，用细小的水流把多余的染料冲洗掉，被菌体吸附的染料则保留。

4.媒染。

加碘液覆盖涂面染1 min。在媒染处理时，媒染剂与染料形成不溶性的化合物，可增加染料和细菌的亲和力。

5.水洗。

用细小的水流缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。

6.脱色。

加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20s-30 s后再进行水洗，吸去水分。

7.复染。

蕃红染色液染色10 s后， 自来水冲洗。

8.干燥。

染色结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。

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以上内容来自小编zzj 2021.1.19