中文名称:荧光CY5-聚乙二醇-小麦胚芽凝集素
英文名称:Cyanine5-PEG-Wheat germ agglutinin
Cy5:
Cy5 是一种近红外荧光染料,发射波长约为750-780 nm。它具有高荧光强度和较低的背景噪声,适合进行深层组织成像和高灵敏度检测。
聚乙二醇(PEG):
PEG 是一种常用的生物材料,具有优良的生物相容性和药物递送性能。PEG的引入提高了染料的溶解性,增强了稳定性,并减少了非特异性结合。
小麦胚芽凝集素(WGA):
WGA 是一种从小麦胚芽中提取的凝集素,能够特异性地结合到含有N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid, Neu5Ac)和N-乙酰半乳糖胺(N-acetylgalactosamine, GalNAc)的糖链上。WGA常用于细胞标记和糖链分析。
制备方法
合成Cy5-PEG:
PEG化:将Cy5的活化衍生物(如Cy5-NHS酯)与PEG反应,形成Cy5-PEG。这一过程通常通过化学反应如酯化或胺化反应实现。
PEG化WGA:
PEG修饰:将PEG化试剂(如PEG-NHS酯)与WGA反应,形成PEG-WGA。PEG化可以提高WGA的溶解性和稳定性。
标记:
Cy5标记:将Cy5-PEG与PEG化的WGA进行偶联,形成Cy5-PEG-WGA复合物。标记过程通常通过化学反应实现,如酯化或氨基化反应。
纯化与鉴定:
纯化:使用透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)等方法去除未反应的试剂和杂质,纯化得到Cy5-PEG-WGA。
鉴定:通过紫外-可见光谱(UV-Vis)、荧光光谱、质谱(MS)等技术确认标记的完成和产品的纯度。
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