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荧光素标记T7多肽,FITC-T7
发布时间:2024-09-13     作者:zyl   分享到:

中文名称:荧光素标记T7多肽

英文名称:FITC-T7

标记步骤概述:

  1. 合成T7多肽:

    • 合成含有T7序列的多肽。T7多肽的序列一般为:YSKTSKSHR(这个序列可能根据具体应用有所变化)。

    • 使用合成化学或重组蛋白表达系统获得纯化的T7多肽。

  2. 准备荧光素试剂:

    • 选择适当的荧光素(如荧光素异硫氰酸酯,FITC)作为标记试剂。FITC是一种常用的绿色荧光染料,可以通过其氨基与多肽中的氨基反应进行标记。

  3. 标记反应:

    • 将T7多肽溶解在适当的缓冲液中,通常是磷酸盐缓冲液(PBS)或其他适合的生物缓冲液。

    • 将荧光素标记试剂(如FITC)溶解在适当的溶剂中,通常使用DMSO(Dimethyl sulfoxide)作为溶剂。

    • 将荧光素试剂加入T7多肽溶液中,通常在室温下反应1-2小时。反应条件可以根据具体的试剂和实验要求进行优化。

纯化和鉴定:

反应完成后,通过逆相高效液相色谱(RP-HPLC)或凝胶过滤色谱等方法去除未结合的荧光素和其他反应副产品。

使用紫外-可见分光光度计或荧光显微镜检测标记效果,确保荧光素成功标记了T7多肽。

应用:

标记后的T7多肽可以用于荧光显微镜观察、流式细胞术、免疫检测(如ELISA)以及其他需要荧光标记的实验。

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