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PI单染色法原理及操作步骤
发布时间:2021-01-20     作者:zzj   分享到:

荧光染料PI(碘化丙啶)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测,英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物,在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用,

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PI单染色法实验步骤

1. 收集细胞{数目约(1~ 5)×106个/mL},500 ~ 1000 r/min离心5min,弃去培养液。

2. 3ml PBS洗涤1次。

3. 离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1—2小时。

4. 离心弃去固定液,3mlPBS重悬5min。

5. 400目的筛网过滤1次,500—1000r/min离心5min,弃去PBS。

6. 用1ml PI染液染色,4℃避光30min。

7. 流式细胞仪检测:PI用氩离子激发荧光,激光光波波长为488nm,发射光波波长大于630nm,产生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。


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以上内容来自齐岳小编 zzj2021.1.20

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