中文名称:FITC-LDH;FITC-Lactate dehydrogenase
英文名称:异硫氰酸荧光素FITC标记乳酸脱氢酶
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
使用FITC(异硫氰酸荧光素)标记乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase, LDH)是一种有效的方法,可以用于研究该酶的生物分布、细胞内定位和功能。以下是标记的基本步骤和注意事项:
合成步骤
材料准备:
乳酸脱氢酶:使用高纯度的重组或提取的LDH。
FITC溶液:将FITC溶解在无水DMF或DMSO中,通常浓度为1-5 mg/mL。
缓冲液准备:
将LDH溶解在适当的缓冲液中(如PBS),浓度一般在1-5 mg/mL。
调整反应体系的pH值至碱性(pH 8-9),以促进偶联反应。
偶联反应:
将FITC溶液缓慢加入LDH溶液中,轻轻混合以确保充分反应。
在室温下反应1-4小时,具体时间可根据实验条件优化。
纯化:
反应结束后,通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)等方法去除未反应的FITC和其他小分子杂质,收集FITC标记的乳酸脱氢酶。
表征:
使用荧光光谱、高效液相色谱(HPLC)和质谱(MS)等技术对标记产物进行纯度和结构的表征。
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