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产品名称：FITC异硫氰酸荧光素标记钙调蛋白；FITC-CaM

FITC（异硫氰酸荧光素）是一种常用的荧光染料，广泛应用于生物学和医学研究中，用于标记蛋白质以实现荧光标记和可视化。当FITC用于标记钙调蛋白（CaM）时，形成的复合物通常被称为FITC-CaM。以下是对FITC异硫氰酸荧光素标记钙调蛋白（FITC-CaM）的详细介绍：

一、标记原理

FITC标记蛋白质的原理主要是通过其异硫氰酸酯基团（—NCS）与蛋白质分子中的氨基（如赖氨酸的ε-氨基）发生反应，形成稳定的硫碳氨基键（thiocarbamide bond），从而将FITC连接到蛋白质上。这种标记过程通常在碱性条件下进行，以促进反应的进行。

二、标记步骤

准备蛋白质溶液：将钙调蛋白溶解在适当的缓冲液中，如0.1M碳酸钠缓冲液（pH 9.0），并确保蛋白质浓度足够高，通常≥2mg/mL。缓冲液的选择和pH值的调整对于标记反应的效率和特异性至关重要。

准备FITC溶液：将FITC粉末溶解在无水DMSO中，配制成一定浓度的溶液，如1mg/mL。注意FITC应避光保存，以防止其荧光性能下降。

混合反应：将FITC溶液逐滴加入到蛋白质溶液中，并在加入过程中轻轻搅拌，以确保反应均匀进行。对于1mL蛋白溶液，通常加入一定量的FITC溶液（如50μL），具体量可根据实验需求进行调整。

孵育反应：将混合后的反应液在适当的温度下（如4°C）避光孵育一段时间（如8小时），以使FITC与蛋白质充分反应。

终止反应：加入适量的终止剂（如NH4Cl）以终止反应，并将反应液置于适当条件下（如4°C）继续孵育一段时间（如2小时），以确保反应完全停止。

纯化产物：通过适当的纯化方法（如凝胶过滤层析）去除未反应的FITC和其他杂质，得到纯净的FITC-CaM复合物。

三、应用与注意事项

应用：

FITC-CaM复合物可用于细胞生物学研究，通过荧光显微镜观察细胞内钙调蛋白的分布和动态变化。

该复合物还可用于研究钙调蛋白与其他分子的相互作用，以及钙调蛋白在信号转导过程中的作用机制。

产地：西安

纯度：95%以上

状态：固体/粉末/溶液

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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