PCR介导的定点突变，定制服务

齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

PCR 介导的定点突变是一种常用的分子生物学技术，用于在基因的特定位置引入精确的突变。

该技术的基本原理是利用 PCR 反应，通过设计含有突变碱基的引物，以野生型基因作为模板进行扩增。在 PCR 过程中，引物与模板结合并延伸，将突变碱基引入到新合成的 DNA 链中。

首先，根据要突变的位点和突变类型，设计一对引物。其中，正向引物或反向引物在突变位点处包含与野生型不同的碱基。然后，进行 PCR 反应，反应体系包括模板 DNA、突变引物、dNTPs、DNA 聚合酶和合适的缓冲液。PCR 反应通常包括多个循环，每个循环包括变性、退火和延伸三个步骤。

在退火步骤中，突变引物与模板 DNA 结合，DNA 聚合酶以模板为基础，按照引物的序列进行延伸，合成新的 DNA 链。经过多个循环后，得到大量含有突变位点的 DNA 片段。

PCR 产物可以通过多种方法进行处理和鉴定。例如，可以通过酶切和连接将突变后的 DNA 片段克隆到合适的载体中，然后进行测序验证，以确保突变的成功引入。

建立shRNA敲低稳转株涉及多个关键步骤：首先，设计针对特定目标基因的shRNA序列，以确保其特异性和效率;接着，构建携带shRNA的表达载体，通常是病毒载体如慢病毒或腺相关病毒;然后通过转染或转导将载体引入目标细胞;通过筛选培养基选取稳定表达目标shRNA的细胞株。

产品：

应用CRISPR/Cas9技术敲除多个靶基因

利用CRISPR/Cas9技术构建敲除MEIS2基因的HEK293T人胚肾细胞系

利用CRISPR/CAS9技术编辑水稻香味基因Badh2

基于CRISPR/Cas9技术的水稻千粒重基因tgw6突变体的创建

基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除

全新DNA编辑工具——CRISPR-Cas9技术

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。