基因敲入细胞稳转株构建（插入片段<3 kb），定制服务

基因敲入细胞稳转株构建（插入片段 < 3kb）是一种用于在细胞基因组中精确插入特定基因片段的技术。

首先，设计并合成包含目标基因片段的 DNA 构建体。这个构建体通常包括启动子、目标基因片段、终止子以及两侧的同源臂，同源臂用于与细胞基因组中的特定区域进行同源重组。

然后，选择合适的细胞系进行基因敲入实验。常用的细胞系包括哺乳动物细胞系，如 HEK293、CHO 等。

接下来，使用基因编辑技术将构建体导入细胞中。对于插入片段小于 3kb 的情况，可以采用多种方法，如 CRISPR/Cas9 系统结合同源重组修复。通过设计特定的向导 RNA（gRNA）引导 Cas9 核酸酶在细胞基因组中特定位置进行切割，然后提供含有目标基因片段的构建体，利用细胞自身的同源重组机制将目标基因片段精确插入到基因组中。

在导入构建体后，进行细胞筛选和鉴定。可以使用筛选标记，如抗生素抗性基因，筛选出成功整合目标基因片段的细胞。然后通过分子生物学方法，如 PCR、Southern blot、DNA 测序等，对筛选出的细胞进行进一步鉴定，确保目标基因片段正确插入且没有其他意外的突变。

基因敲入细胞稳转株构建在研究基因功能、构建疾病模型、开发基因治疗方法等方面具有重要意义。

齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

产品：

亚克隆重组质粒的构建

多转座子载体的构建

亚克隆野生型与张力蛋白在10号染色体同源缺失的磷酸酶(PTEN)基因

PTEN基因亚克隆和pTRE-PTEN反应质粒构建

cDNA片段亚克隆至哺乳动物细胞高表达型穿梭载体中

克隆小鼠趋化因子Fractalkine(FK)基因构建真核表达质粒

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。