基因敲除细胞稳转株构建（缺失突变），技术服务，齐岳生物供应

基因敲除细胞稳转株构建（缺失突变）是一种通过在细胞中引入特定的缺失突变来实现基因敲除的技术。

首先，确定要敲除的目标基因以及需要缺失的基因片段。通过对目标基因的结构和功能进行分析，设计合适的缺失策略，确保缺失的片段能够有效地破坏基因的功能。

然后，选择合适的基因编辑技术来引入缺失突变。常见的方法有 CRISPR/Cas9 系统结合同源重组修复。设计针对目标基因两侧区域的向导 RNA（gRNA），引导 Cas9 核酸酶在这两个位置进行切割，产生双链断裂。同时，提供一个含有缺失片段两侧同源臂的 DNA 模板，细胞通过同源重组机制将这个模板整合到基因组中，从而实现特定基因片段的缺失。

在引入缺失突变后，进行细胞筛选和鉴定。可以使用筛选标记，如抗生素抗性基因，筛选出成功整合缺失突变的细胞。然后通过 PCR、Southern blot、DNA 测序等方法验证缺失突变的正确性和完整性。

获得基因敲除细胞稳转株后，可以对其进行进一步的研究。例如，分析基因敲除对细胞生理过程、信号通路、代谢网络等的影响，揭示目标基因的功能和作用机制。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

产品：

利用shRNA慢病毒载体构建稳转的细胞系

敲低因表达的shRNA、慢病毒载体构建

shRNA慢病毒质粒的构建

shRNA敲减慢病毒

shRNA敲减细胞株

Cas9过表达稳转细胞株

Six2基因shRNA敲减慢病毒表达载体

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。