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基因敲低细胞稳转株构建,定制服务
发布时间:2024-10-16     作者:axc   分享到:

基因敲低细胞稳转株构建,定制服务

基因敲低细胞稳转株构建是一种用于降低特定基因表达水平的技术。首先,选择合适的基因敲低方法。常见的方法有 RNA 干扰(RNAi)和 CRISPRi(CRISPR 干扰)等。RNAi 是通过导入小干扰 RNA(siRNA)或短发夹 RNA(shRNA)来特异性地降解目标 mRNA,从而降低基因的表达水平。CRISPRi 则是利用 CRISPR/Cas9 系统,将失去核酸酶活性的 Cas9(dCas9)与转录抑制因子结合,靶向目标基因的启动子区域,抑制基因的转录。

对于 RNAi 方法,设计并合成针对目标基因的 siRNA 或构建 shRNA 表达载体。对于 shRNA 表达载体,通常包含一个启动子、shRNA 序列和一个筛选标记。

然后,将选择的基因敲低构建体导入细胞中。可以使用脂质体转染、电穿孔等方法将构建体导入细胞。对于 shRNA 表达载体,可以通过稳定转染的方法将其整合到细胞基因组中,从而获得稳定表达 shRNA 的细胞株。

在导入构建体后,进行细胞筛选和鉴定。如果使用了筛选标记,可以在含有相应筛选药物的培养基中培养细胞,筛选出成功整合构建体的细胞。然后通过实时定量 PCR、Western blot 等方法检测目标基因的表达水平,验证基因敲低的效果。

基因敲低细胞稳转株构建

产品:

小鼠硒蛋白基因shRNA敲减慢病毒重组载体

构建tead4敲减慢病毒载体

构建四环素诱导的YAP1敲减的病毒质粒

慢病毒介导ASRGL1 shRNA

稳定敲低Notch3基因H1299细胞系


注意事项:

本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。


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