文库质粒克隆(包括oligo合成和NGS验证),技术服务
文库质粒克隆是一种构建大规模质粒文库的技术,它在基因功能研究、药物筛选和合成生物学等领域有着的应用。该过程包括 oligo 合成和 NGS 验证两个重要环节。
Oligo 合成是文库质粒克隆的起始步骤。研究人员根据所需的基因序列或变异设计特定的寡核苷酸(oligo)。这些 oligo 通常包含启动子、编码序列、终止子以及其他必要的调控元件。通过化学合成的方法,可以大量生产**的 oligo。
在合成 oligo 后,将其克隆到质粒载体中。这一过程需要使用一系列分子生物学技术,如酶切、连接等。酶切用于在质粒载体和 oligo 上产生互补的粘性末端或平末端,连接则将 oligo 插入到质粒载体中,形成重组质粒。
接下来是 NGS 验证。NGS(Next - Generation Sequencing,下一代测序)技术可以对文库中的大量质粒进行快速、高通量的测序。通过 NGS 验证,可以确定文库中质粒的序列准确性和多样性。它能够检测出是否存在错误的插入、缺失或突变,以及评估文库的覆盖度和均匀性。
例如,在药物筛选中,通过构建包含大量基因变异的文库质粒,并利用 NGS 验证其质量,可以筛选出对特定药物具有抗性或敏感性的基因变体。在基因功能研究中,文库质粒克隆可以用于构建基因敲除文库或过表达文库,通过 NGS 验证后,可用于大规模筛选与特定生物学过程相关的基因。
齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
产品:
慢病毒载体质粒
慢病毒载体的骨架质粒合成
构建表达载体(过表达,敲除或者敲低)
基因敲减慢病毒载体感染细胞株
慢病毒制备和导入细胞
慢病毒及稳转细胞构建
RNAi基因敲减细胞系构建服务
MicroRNA抑制表达稳转细胞系构建服务
构建慢病毒表达载体
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。