全基因组CRISPRa文库，技术服务，齐岳生物供应

全基因组 CRISPRa（CRISPR activation）文库是一种强大的工具，用于在全基因组范围内激活基因表达，从而深入研究基因功能和调控机制。

一、CRISPRa 技术原理

CRISPR - Cas 系统是细菌和古菌中一种适应性免疫系统，经过改造后可用于基因编辑和基因调控。CRISPRa 利用失活的 Cas 蛋白（如 dCas9）与转录激活因子融合，通过导向 RNA（gRNA）将激活复合物引导至特定基因的启动子区域，从而增强基因的转录。

gRNA 是 CRISPRa 系统的关键组成部分，它可以与靶基因的特定序列互补配对，引导 dCas9 - 转录激活因子复合物结合到启动子上。不同的 gRNA 可以靶向不同的基因，从而构建全基因组 CRISPRa 文库。

二、全基因组 CRISPRa 文库构建

gRNA 设计与合成

首先，需要根据全基因组序列设计大量针对不同基因启动子区域的 gRNA 序列。这些 gRNA 序列需要经过精心设计，以确保其特异性和有效性。然后，通过化学合成或体外转录等方法合成这些 gRNA。

文库载体构建

将合成的 gRNA 序列克隆到合适的载体中，形成全基因组 CRISPRa 文库。载体通常包含启动子、终止子、筛选标记等元件，以确保 gRNA 的正确表达和细胞筛选。

文库质量检测

构建好的文库需要进行质量检测，包括文库的多样性、覆盖率、准确性等方面。可以通过高通量测序等方法对文库进行分析，确保文库能够有效地覆盖全基因组的基因。

三、应用领域

基因功能研究

通过全基因组 CRISPRa 文库筛选，可以激活单个或多个基因，观察细胞或生物体的表型变化，从而确定基因的功能。例如，可以筛选出对细胞增殖、分化、凋亡等过程有重要影响的基因。

基因调控网络研究

全基因组 CRISPRa 文库可以同时激活多个基因，从而研究基因之间的相互作用和调控网络。通过分析不同基因组合激活后的表型变化，可以揭示基因之间的协同或拮抗关系，构建基因调控网络模型。

产品：

RNA体外转录载体

mRNA体外转录载体

Probe-RNA体外转录载体

Small RNA体外转录载体

Cas9表达载体，P元件转座载体

Cas9表达载体，att位点整合载体

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。