构建ZFD(氨基酸137-176)单结构域缺失的截短体质粒,技术服务
构建 ZFD(氨基酸 137 - 176)单结构域缺失的截短体质粒是一项具有重要价值的分子生物学技术。
ZFD 结构域在特定的生物学过程中可能起着关键作用。为了深入研究该结构域的功能,构建单结构域缺失的截短体质粒是一种有效的方法。
首先,通过生物信息学手段准确确定 ZFD 结构域的位置和氨基酸序列范围。在此基础上,设计特异性引物,利用 PCR 技术扩增出目标蛋白质基因中去除了 ZFD 结构域对应氨基酸序列的片段。随后,将该片段与合适的质粒载体进行酶切连接,构建截短体质粒。
在质粒构建过程中,要确保选择的载体具有良好的稳定性和合适的表达调控元件,以便后续的实验操作和蛋白质表达。构建完成后,需要进行全面的验证。测序是必不可少的步骤,以确认截短后的基因序列准确无误。同时,可以通过蛋白表达实验检测截短后的蛋白质是否能够在适当的表达系统中成功表达。此外,功能分析实验也是关键,通过细胞实验、生化实验等手段观察缺失 ZFD 结构域后蛋白质的功能变化。
这种截短体质粒在多个领域具有广泛的应用。在基础研究方面,它有助于揭示蛋白质结构与功能的紧密关系。通过对比含有和缺失 ZFD 结构域的蛋白质的功能差异,可以明确该结构域在蛋白质功能中的具体贡献。例如,可能发现 ZFD 结构域对于蛋白质的稳定性、与特定配体的结合能力或者在细胞信号传导中的作用至关重要。在药物研发领域,了解 ZFD 结构域的功能可以为药物设计提供潜在的靶点。如果该结构域与疾病相关,那么可以针对其开发针对性的药物干预措施。
齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务,包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体(含 Cas9)与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中,在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后,细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复(HDR)实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。
产品:
CRlSPR/Cas9 gRNA文库慢病毒包装
DFR基因的单碱基突变
DNA Damage Response Genes MKOv4 Library
eGFP-LIN28A过表达小鼠胚胎干细胞E14细胞系
eGFP-LIN28A敲入的小鼠胚胎干细胞E14细胞系
ERα基因shRNAi慢病毒载体的构建
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。