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Concanavalin A-TRITC 罗丹明荧光标记伴刀豆素球蛋白A
发布时间:2024-10-22     作者:zyl   分享到:

罗丹明荧光标记伴刀豆素球蛋白A 是一种常用于细胞成像、免疫检测和其他生物研究的标记方法。伴刀豆素球蛋白A(Concanavalin A,Con A)是一种植物来源的凝集素,常用于研究糖类和糖蛋白的相互作用。通过罗丹明的标记,可以对Con A进行可视化,从而帮助研究其生物学功能。

材料准备

  1. 伴刀豆素球蛋白A(Con A):选择高纯度的Con A。

  2. 罗丹明标记试剂:通常使用罗丹明-NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester),这种形式的罗丹明能与蛋白质的氨基反应。

  3. 缓冲液:如磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)。

罗丹明标记伴刀豆素球蛋白A的步骤

1. 溶解Con A

  • 将伴刀豆素球蛋白A溶解在适当的缓冲液中,通常浓度为1-10 mg/mL。

2. 准备罗丹明-NHS溶液

  • 将罗丹明-NHS酯溶解在无水DMSO或其他适宜的溶剂中,通常浓度为1-5 mg/mL。

3. 反应步骤

  1. 混合反应:

    • 将罗丹明-NHS溶液缓慢加入Con A溶液中,通常推荐的摩尔比为1:5至1:10(罗丹明与Con A)。

    • 温和混合,避免产生气泡。

  2. 反应条件:

    • 在室温下反应1-2小时,或在4°C下反应过夜,以确保充分的标记。

  3. 终止反应:

    • 反应结束后,加入适量的甘氨酸(通常为10-20 mM),以终止反应并去除未反应的罗丹明。

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