Concanavalin A-TRITC 罗丹明荧光标记伴刀豆素球蛋白A
发布时间:2024-10-22     作者:zyl   分享到:
罗丹明荧光标记伴刀豆素球蛋白A 是一种常用于细胞成像、免疫检测和其他生物研究的标记方法。伴刀豆素球蛋白A(Concanavalin A,Con A)是一种植物来源的凝集素,常用于研究糖类和糖蛋白的相互作用。通过罗丹明的标记,可以对Con A进行可视化,从而帮助研究其生物学功能。
材料准备
伴刀豆素球蛋白A(Con A):选择高纯度的Con A。
罗丹明标记试剂:通常使用罗丹明-NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester),这种形式的罗丹明能与蛋白质的氨基反应。
缓冲液:如磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)。
罗丹明标记伴刀豆素球蛋白A的步骤
1. 溶解Con A
将伴刀豆素球蛋白A溶解在适当的缓冲液中,通常浓度为1-10 mg/mL。
2. 准备罗丹明-NHS溶液
将罗丹明-NHS酯溶解在无水DMSO或其他适宜的溶剂中,通常浓度为1-5 mg/mL。
3. 反应步骤
混合反应:
将罗丹明-NHS溶液缓慢加入Con A溶液中,通常推荐的摩尔比为1:5至1:10(罗丹明与Con A)。
温和混合,避免产生气泡。
反应条件:
在室温下反应1-2小时,或在4°C下反应过夜,以确保充分的标记。
终止反应:
反应结束后,加入适量的甘氨酸(通常为10-20 mM),以终止反应并去除未反应的罗丹明。
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