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CY5-Insulin 荧光染料Cy5标记胰岛素
发布时间:2024-10-22     作者:zyl   分享到:

中文名称:荧光染料Cy5标记胰岛素

英文名称:CY5-Insulin      

包装:mg级和g级

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

储存时间:1年

保存:冷藏

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验

荧光染料Cy5标记胰岛素

材料准备

  1. 胰岛素:选择高纯度的胰岛素,通常为人胰岛素或重组胰岛素。

  2. Cy5染料:获取Cy5-NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester),适用于与胰岛素的结合。

  3. 缓冲液:PBS(磷酸盐缓冲液,pH 7.4)或其他适合的缓冲液。

  4. 甘氨酸:用于终止反应并去除未反应的Cy5。

合成步骤

1. 准备胰岛素溶液

  • 溶解胰岛素:将胰岛素溶解在PBS缓冲液中,推荐浓度为1-5 mg/mL。

2. 准备Cy5-NHS酯溶液

  • 溶解Cy5-NHS酯:将Cy5-NHS酯溶解在适当的有机溶剂(如DMSO或无水乙醇)中,浓度通常为1-10 mg/mL。

3. 反应步骤

  1. 混合反应:

    • 将Cy5-NHS酯溶液缓慢加入到胰岛素溶液中,推荐的摩尔比为1:5至1:10(Cy5与胰岛素)。

  2. 反应条件:

    • 在室温下反应1-2小时,或在4°C下反应过夜,以确保充分标记。

  3. 终止反应:

    • 反应结束后,加入适量的甘氨酸(通常为10-20 mM),以终止反应并去除未反应的Cy5。

4. 纯化

  1. 去除未反应的Cy5:

    • 使用透析、凝胶过滤(如Sephadex或Superdex)或离心过滤(如Ultracel)去除未反应的Cy5。

  2. 收集标记的胰岛素:

    • 收集标记后的胰岛素,并进行浓度测定。

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