中文名称:荧光染料Cy5标记胰岛素
英文名称:CY5-Insulin
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物科技有限公司
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
材料准备
胰岛素:选择高纯度的胰岛素,通常为人胰岛素或重组胰岛素。
Cy5染料:获取Cy5-NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester),适用于与胰岛素的结合。
缓冲液:PBS(磷酸盐缓冲液,pH 7.4)或其他适合的缓冲液。
甘氨酸:用于终止反应并去除未反应的Cy5。
合成步骤
1. 准备胰岛素溶液
溶解胰岛素:将胰岛素溶解在PBS缓冲液中,推荐浓度为1-5 mg/mL。
2. 准备Cy5-NHS酯溶液
溶解Cy5-NHS酯:将Cy5-NHS酯溶解在适当的有机溶剂(如DMSO或无水乙醇)中,浓度通常为1-10 mg/mL。
3. 反应步骤
混合反应:
将Cy5-NHS酯溶液缓慢加入到胰岛素溶液中,推荐的摩尔比为1:5至1:10(Cy5与胰岛素)。
反应条件:
在室温下反应1-2小时,或在4°C下反应过夜,以确保充分标记。
终止反应:
反应结束后,加入适量的甘氨酸(通常为10-20 mM),以终止反应并去除未反应的Cy5。
4. 纯化
去除未反应的Cy5:
使用透析、凝胶过滤(如Sephadex或Superdex)或离心过滤(如Ultracel)去除未反应的Cy5。
收集标记的胰岛素:
收集标记后的胰岛素,并进行浓度测定。
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