中文名称:辣根过氧化物酶的CY3荧光标记物
英文名称:CY3-HRP
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物科技有限公司
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)的CY3荧光标记物 是将CY3荧光染料与辣根过氧化物酶结合的生物标记物,广泛用于免疫检测、细胞成像和其他生物实验中。以下是关于该标记物的详细信息,包括合成步骤和应用。
材料准备
辣根过氧化物酶(HRP):选择高纯度的HRP,通常用于实验的分子量约为40 kDa。
CY3染料:获取CY3-NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester),适合与蛋白质的氨基结合。
缓冲液:使用PBS(磷酸盐缓冲液,pH 7.4)或其他适合的生物缓冲液。
甘氨酸:用于终止反应并去除未反应的CY3。
合成步骤
1. 准备HRP溶液
溶解HRP:将HRP溶解在PBS缓冲液中,推荐浓度为1-5 mg/mL。
2. 准备CY3-NHS酯溶液
溶解CY3-NHS酯:将CY3-NHS酯溶解在适当的有机溶剂(如DMSO或无水乙醇)中,浓度通常为1-10 mg/mL。
3. 反应步骤
混合反应:
将CY3-NHS酯溶液缓慢加入HRP溶液中,推荐的摩尔比为1:5至1:10(CY3与HRP)。
反应条件:
在室温下反应1-2小时,或在4°C下反应过夜,以确保充分标记。
终止反应:
反应结束后,加入适量的甘氨酸(通常为10-20 mM),以终止反应并去除未反应的CY3。
4. 纯化
去除未反应的CY3:
使用透析、凝胶过滤(如Sephadex或Superdex)或离心过滤(如Ultracel)去除未反应的CY3。
收集标记的HRP:
收集标记后的HRP,并进行浓度测定。
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