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产品名称：荧光素异硫氰酸酯(FITC)标记蛋白质，FITC标记CK18，齐岳定制

FITC标记蛋白质

标记原理：

FITC的异硫氰酸酯基团（-N=C=S）可以与蛋白质分子中的氨基（如赖氨酸的ε-氨基）发生反应，形成硫碳氨基键，从而将FITC连接到蛋白质上。

标记步骤：

准备蛋白质溶液：将需要标记的蛋白质溶解在适当的缓冲液中，如0.1M碳酸钠缓冲液（pH9.0），使其浓度达到适当的标记浓度，通常≥2mg/mL。

准备FITC溶液：将FITC溶解在无水DMSO中，制成浓度为1mg/mL的储备液。使用前，将储备液稀释到适当的标记浓度。

标记反应：将蛋白质溶液和FITC溶液混合，使蛋白质与FITC的摩尔比在一定范围内（如1:10至1:50）。在反应体系中加入适量的缓冲液，使总体积为适当值（如100μL左右）。

反应条件：将反应体系置于适当的温度（如室温或37°C）下孵育一定时间（如1-2小时或更长时间，如4°C避光孵育8小时），以促进标记反应的进行。

终止反应：标记反应结束后，加入适量的终止液（如NH4Cl溶液或甘氨酸、硼酸缓冲液），以终止反应。

纯化标记蛋白：为了去除未结合的FITC，可以使用凝胶过滤、透析或离心等方法对标记蛋白进行纯化。

储存标记蛋白：将纯化后的标记蛋白储存于适当的缓冲液中，在4°C下避光保存。可加入防腐剂（如0.1%叠氮化钠）和蛋白稳定剂（如1%BSA，针对低浓度蛋白）。

标记效果评估：

可以通过测定495nm和280nm处的吸光值来鉴定荧光素和蛋白的比值（F/P），F/P应位于0.3-1.0。小于该比例则信号太低，高于该比例则背景太高。

FITC标记CK18

CK18是一种细胞角蛋白，主要存在于肝细胞、胆管上皮细胞和某些类型的肿瘤细胞中。FITC标记CK18的步骤与上述FITC标记蛋白质的步骤类似，但需要注意以下几点：

蛋白质的选择：确保所选用的CK18蛋白质是纯净且未被污染的。

标记条件的优化：由于不同蛋白质的化学性质（如等电点、亲水性、分子量等）可能影响标记效率和特异性，因此需要对标记条件（如温度、时间、摩尔比等）进行优化，以获得**的标记效果。

纯化步骤的注意：在纯化标记后的CK18时，应确保彻底去除未结合的FITC，以避免影响后续的实验结果。

产地：西安

纯度：95%以上

状态：固体/粉末/溶液

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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