目的基因的亚克隆,定制服务
目的基因的亚克隆是分子生物学研究中一项具有重要意义的操作,它能为更深入的基因分析和功能研究创造条件。
在进行目的基因的亚克隆之前,需要有原始的含有目的基因的材料。这可能是之前构建的重组质粒、基因组文库或者 cDNA 文库等。例如,如果是从重组质粒开始,这个质粒可能已经经过了一系列的克隆和筛选过程,包含了我们感兴趣的目的基因,但可能存在于较大的质粒背景中,不利于对目的基因的精细研究。
首先要选择合适的亚克隆载体。亚克隆载体的选择依据目的基因的特点和后续研究的需求而定。如果后续要在真核细胞中表达目的基因,就需要选择具有真核表达元件的载体,如带有真核启动子、增强子和合适的 poly(A)信号序列的载体。如果只是在原核细胞中进行基因扩增或简单的蛋白表达,像 pET 系列等原核表达载体就是不错的选择。这些载体通常还带有选择标记,如抗生素抗性基因,方便筛选成功导入载体的宿主细胞。
然后是对原始材料和亚克隆载体进行处理。一般通过限制酶酶切来获取目的基因片段和制备载体的合适末端。限制酶的选择至关重要,需要根据目的基因和载体上的酶切位点来确定。例如,若目的基因两端存在 EcoRI 和 HindIII 酶切位点,且亚克隆载体上也有这两个位点或者经过改造后可以引入这两个位点,就可以使用这两种酶进行双酶切。酶切反应需要在适宜的温度、缓冲液条件下进行,以确保酶切的准确性和完全性。
产品:
CRISPR/Cas9基因敲入小鼠
CRISPR/Cas9技术构建 miRNA-29 b1基因敲除小鼠
CRISPR/Cas9技术构建小鼠癌症模型
CRISPR/Cas9技术应用之基因敲除
Crispr/Cas9技术在CHO细胞中基因敲除
CRISPR/Cas9技术在基因组中进行定点基因突变
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。