shRNA慢病毒质粒的构建，定制服务

shRNA（短发夹 RNA）质粒的构建是基因沉默研究中的关键步骤，以下是其详细过程。

首先，shRNA 序列设计是基础。依据目标基因的 mRNA 序列，利用生物信息学工具选择合适的靶点。通常靶点长度在 19 - 29bp，优先选择基因编码区或 3'UTR 区域中特异性高的序列，避免与其他基因有过多同源性，以减少脱靶效应。例如，对于特定的肿瘤相关基因，通过对其全序列分析，找出在该基因中保守且独特的片段作为 shRNA 的靶向序列。

设计好 shRNA 序列后，合成两条互补的寡核苷酸链。一条链包含与目标基因互补的序列、环序列（一般为 4 - 10bp 的非互补序列，如 TTCAAGAGA）和部分反向互补序列，另一条是其完全互补链。合成后的寡核苷酸链需进行退火处理，在合适的缓冲液中，加热至 95℃左右，然后缓慢冷却至室温，使两条链形成双链结构，即具有发夹结构的 shRNA。

选择合适的质粒载体至关重要。常用的质粒载体包含启动子、多克隆位点（MCS）和选择标记等元件。启动子一般选择 RNA 聚合酶 Ⅲ 启动子，如 U6 或 H1 启动子，它们能有效驱动 shRNA 在细胞内的转录。MCS 方便 shRNA 序列的插入，选择标记通常是抗生素抗性基因，如氨苄青霉素抗性基因或卡那霉素抗性基因，用于筛选含有重组质粒的宿主细胞。

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

产品：

病毒载体构建（慢病毒、腺病毒、AAV）

哺乳动物CRISPR基因编辑载体

哺乳动物CRISPR基因表达调控载体

哺乳动物miR30-shRNA干扰载体 质粒载体

哺乳动物shRNA干扰载体

哺乳动物shRNA干扰载体 质粒载体

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。