靶向PRL-3基因的shRNA慢病毒载体的构建，定制服务

靶向 PRL - 3（磷脂酶 C 相关蛋白 - 3）基因的 shRNA 载体构建对于研究 PRL - 3 在肿瘤转移等相关病理过程中的作用具有重要意义。首先，了解 PRL - 3 基因的结构和功能特点，尤其是其 mRNA 序列。通过生物信息学分析，确定 PRL - 3 基因 mRNA 上的合适靶点。PRL - 3 在肿瘤细胞的迁移和侵袭过程中发挥关键作用，可选择在其参与催化活性或与其他蛋白相互作用相关的 mRNA 区域作为靶点，这些区域对于 PRL - 3 基因功能的发挥至关重要。设计长度约为 20bp 的 shRNA 序列，要确保其特异性，避免与其他基因尤其是其他磷脂酶相关基因的同源性，以减少脱靶效应。

设计好 shRNA 序列后，合成两条互补的寡核苷酸链。一条链包含与 PRL - 3 基因 mRNA 互补的序列、环序列（如 TTCAAGAGA）和部分反向互补序列，另一条链则是其完全互补链。将这两条寡核苷酸链在合适的缓冲液中进行退火处理，通过加热至约 95℃后缓慢冷却至室温，形成具有发夹结构的双链 shRNA。

选择合适的载体用于构建靶向 PRL - 3 基因的 shRNA 载体。常用的载体应具备启动子、多克隆位点（MCS）和选择标记等元件。可选择具有 RNA 聚合酶 Ⅲ 启动子（如 U6 启动子）的载体，因为它能有效驱动 shRNA 的转录。MCS 要与 shRNA 两端设计的酶切位点相匹配，方便 shRNA 的插入。选择标记通常是抗生素抗性基因，如氨苄青霉素抗性基因，用于筛选含有重组载体的宿主细胞。

对载体进行酶切，根据 shRNA 序列和载体 MCS 的设计，选择合适的限制酶。比如，如果 shRNA 两端设计有 EcoRI 和 HindIII 酶切位点，且载体 MCS 也包含这两个位点，就使用这两种酶对载体进行双酶切。酶切反应在适宜的缓冲体系下，于 37℃进行，确保酶切完全，使载体在 MCS 处切开，产生与 shRNA 匹配的粘性末端或平末端。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

产品：

移码敲除方案，基因敲除细胞方案

抑制绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体的构建

应用CRISPR/Cas9技术敲除多个靶基因

荧光/蛋白标签定点敲入

荧光蛋白定点敲入

用于植物多基因表达载体构建的质粒系统

诱导STGC3基因定点突变

诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

诱导基因组DNA碱基变异

诱导目的基因定点突变

诱导性基因敲除

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。