构建重组过表达质粒pcDNA3.1-HIF-1α，定制服务

HIF - 1α（低氧诱导因子 - 1α）在细胞对缺氧环境的适应过程中起着核心作用，参与调控众多基因的表达，与肿瘤发生、血管生成等生理病理过程密切相关。构建重组过表达质粒 pcDNA3.1 - HIF - 1α 的目的是为了在真核细胞中高效表达 HIF - 1α，从而深入研究其功能及相关机制。

构建过程：

需要获取 HIF - 1α 的编码序列，可以通过从细胞中提取 RNA，反转录成 cDNA，再利用 PCR 技术扩增得到目的基因片段。然后，将扩增得到的 HIF - 1α 基因片段与 pcDNA3.1 载体进行连接。pcDNA3.1 载体具有强大的 CMV 启动子，能有效驱动基因转录，同时还包含多克隆位点便于外源基因插入、氨苄青霉素抗性基因用于筛选含有质粒的细菌克隆等元件。连接反应通常使用 DNA 连接酶，在合适的缓冲液和温度条件下进行。连接产物转化到感受态大肠杆菌中，在含有氨苄青霉素的培养基上培养，筛选出阳性克隆。对阳性克隆进行提取质粒、酶切鉴定和测序验证，确保 HIF - 1α 基因正确插入到 pcDNA3.1 载体中。

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

齐岳生物提供的定制服务：

构建CSD（氨基酸39-112）单结构域缺失的截短体质粒

构建eGFP基因敲入的报告细胞

构建N端，C端，N+C端单结构域缺失的截短体质粒

构建shRNA表达载体

构建tead4敲减慢病毒载体

构建Tiam1基因的截短体原核表达重组质粒

构建ZFD（氨基酸137-176）单结构域缺失的截短体质粒

构建表达载体(过表达,敲除或者敲低)

构建的ALB敲除的 HepG2 细胞系 (HepG2-AKO)

构建定点突变疾病模型

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除