再生蛋白 Iα(regeneration gene Iα,RegIα)的cDNA过表达质粒，定制服务

构建再生蛋白 Iα 的 cDNA 过表达质粒是一种非常有效的研究手段。通过这种方式可以在细胞和动物模型中，特异性地增加再生蛋白 Iα 的表达，模拟其在组织再生过程中的高表达状态。这有助于深入了解再生蛋白 Iα 在细胞生理和病理过程中的具体功能，以及它在组织再生机制中的详细作用路径，为开发新的组织修复治疗策略提供重要的理论基础。

构建过程和方法

cDNA 获取：首先要从表达再生蛋白 Iα 的组织或细胞中提取总 RNA，然后利用逆转录酶将 RNA 反转录成 cDNA。在这个过程中，需要使用针对再生蛋白 Iα 的特异性引物，通过聚合酶链反应（PCR）技术扩增出再生蛋白 Iα 的 cDNA。

连接反应：将扩增得到的再生蛋白 Iα 的 cDNA 和经过合适限制性内切酶处理后的质粒载体进行连接。这一步通常使用 DNA 连接酶，在适当的缓冲液和温度条件下进行反应，使 cDNA 插入到质粒的多克隆位点中。

转化和筛选：将连接产物转化到感受态细菌（如大肠杆菌）中。通过在含有氨苄青霉素的培养基中培养，筛选出含有再生蛋白 Iα 过表达质粒的阳性克隆。这些克隆可以进一步扩大培养，用于提取质粒。

验证步骤：对提取的质粒进行验证，包括限制性内切酶消化分析，通过电泳检查酶切产物的大小是否符合预期，判断再生蛋白 Iα 的 cDNA 是否正确插入。同时，还需要进行测序分析，确保插入的 cDNA 序列与已知的再生蛋白 Iα 的基因序列完全匹配，没有突变或错误插入的情况。

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

齐岳生物提供的定制服务：

CRISPR敲除（GeCKO V2基因编辑文库）慢病毒文库

CRISPR文库质粒构建

CRISPR系统对照载体

CRISPR系统辅助载体

CRlSPR/Cas9 gRNA文库慢病毒包装

DFR基因的单碱基突变

DNA Damage Response Genes MKOv4 Library

eGFP-LIN28A过表达小鼠胚胎干细胞E14细胞系

eGFP-LIN28A敲入的小鼠胚胎干细胞E14细胞系

ERα基因shRNAi慢病毒载体的构建

ESC或iPSC干细胞点突变

ESC或iPSC干细胞基因敲入

ESC或iPSC干细胞敲除

FGA基因座单碱基突变

GM-CSF融合表达质粒

gRNA和Cas9共表达载体

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除