真核表达质粒载体pcDNA3.1，定制服务

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

结构组成

启动子区域：

pcDNA3.1 载体含有强大的 CMV（巨细胞病毒）启动子。CMV 启动子在多种真核细胞中都具有高效的转录活性，能够驱动插入到该载体中的目的基因进行强表达。它不依赖于细胞类型的特异性转录因子，几乎可以在所有的哺乳动物细胞中启动基因转录，这使得它在基因表达研究中应用非常。

多克隆位点（MCS）：

这是载体的一个关键部分，其设计是为了方便外源基因的插入。MCS 包含了多个独特的限制性内切酶识别位点，这些位点的存在使得研究人员可以使用相应的限制性内切酶对目的基因和载体进行酶切，然后将目的基因准确地插入到载体的特定位置。并且，MCS 的设计确保了插入的基因在正确的阅读框架下，从而能够正确地转录和翻译出有功能的蛋白质。

选择标记基因：

带有氨苄青霉素抗性基因，这是用于在细菌中筛选含有质粒的克隆。当将构建好的重组质粒转化到细菌（如大肠杆菌）中后，在含有氨苄青霉素的培养基中培养，只有含有质粒的细菌能够存活并生长，因为它们获得了氨苄青霉素抗性。这种筛选方法简单且高效，能够确保获得足够数量的含有目的质粒的细菌，用于后续的质粒提取和其他实验。

多聚腺苷酸化信号（poly A）序列：

这个序列对于基因的表达非常重要。它位于目的基因的下游，在转录过程中，当 RNA 聚合酶转录到这个区域时，会在 mRNA 的 3' 端添加多聚腺苷酸尾巴。这个尾巴能够增加 mRNA 的稳定性，使其在细胞内能够更持久地存在，并且有助于 mRNA 从细胞核运输到细胞质中，从而提高目的基因的表达效率。

复制起始位点：

包含原核生物复制起始位点，这使得质粒能够在细菌中进行复制。例如，在大肠杆菌中，该复制起始位点可以引导质粒进行自主复制，使一个质粒分子在细菌繁殖过程中复制成多个拷贝，从而可以大量生产质粒。同时，有些 pcDNA3.1 载体可能还含有真核生物复制起始位点，用于在转染后的真核细胞中进行一定程度的自我复制，以维持目的基因在细胞内的持续表达。

齐岳生物提供的定制服务：

cDNA片段亚克隆至哺乳动物细胞高表达型穿梭载体中

CreERT2表达载体

Cre-Lox调控系统表达对照载体

Cre-Lox调控系统表达辅助载体

Cre-Lox条件性表达载体系统

CRISPR Cas9基因敲除项目

CRISPR Cas9基因敲除项目-大片段敲除

CRISPR Cas9基因敲除项目-单基因敲除

CRISPR Cas9基因敲除项目-多基因敲除

CRISPR Cas9基因敲除项目-移码突变

CRISPR Cas9基因敲入

Crispr/Cas9 基因编辑慢病毒包装

CRISPR/Cas9基因敲除

CRISPR/Cas9基因敲入小鼠

CRISPR/Cas9技术构建 miRNA-29 b1基因敲除小鼠

CRISPR/Cas9技术构建小鼠癌症模型

CRISPR/Cas9技术应用之基因敲除

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除