pcDNA3.1/Cx43真核表达质粒,定制服务
Cx43(Connexin 43)是间隙连接蛋白家族的重要成员。间隙连接是细胞间通讯的一种重要方式,它允许相邻细胞之间直接进行离子、小分子代谢物(如葡萄糖、氨基酸等)和第二信使(如 cAMP、Ca²⁺等)的交换,从而协调细胞的代谢、增殖、分化和电活动等生理过程。Cx43 在许多组织中广泛分布,尤其在心脏、大脑和上皮组织等发挥关键作用。
质粒结构
启动子:pcDNA3.1/Cx43 真核表达质粒通常包含一个强大的启动子,如 CMV(巨细胞病毒)启动子。CMV 启动子在多种真核细胞中都能有效地启动基因转录,为 Cx43 基因在不同细胞类型中的高表达提供动力,确保 Cx43 蛋白能够在转染细胞中大量合成。
Cx43 基因插入位点:Cx43 基因被插入到载体的多克隆位点(MCS)。MCS 是一段包含多个独特限制性内切酶识别位点的 DNA 序列,方便研究人员利用特定的限制性内切酶将 Cx43 基因准确地插入到载体中,并且保证基因的插入方向正确,处于合适的阅读框架,从而使 Cx43 基因能够正确地转录和翻译出有功能的蛋白。
选择标记基因:一般带有抗生素抗性基因,如氨苄青霉素抗性基因。在将质粒转化到细菌(如大肠杆菌)中进行扩增时,含有该质粒的细菌能够在含有氨苄青霉素的培养基中生长,而没有质粒的细菌则会被抑制,这样就可以通过筛选培养来获得含有 pcDNA3.1/Cx43 质粒的细菌克隆,用于后续的实验操作。
多聚腺苷酸化信号(poly A)序列:位于 Cx43 基因下游,在转录过程中,这个序列会引导在 mRNA 的 3' 端添加多聚腺苷酸尾巴,这有助于提高 mRNA 的稳定性,使其能够更好地从细胞核运输到细胞质,并在细胞质中更稳定地存在,从而增加 Cx43 蛋白的翻译效率。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
齐岳生物提供的定制服务:
10kb以上大片段DNA高效精准定点插入
11.1 kb的大片段DNA的高效精准定点插入
Barcode文库构建
Cas9-Cell Line Gene Knock-Out service(CGKO)基因敲除细胞系服务
Cas9-Cell line Gene Mutation service(CGM)基因点突变细胞系
Cas9-Cell line Knock-In service(Cas9-CKI)基因定点敲入细胞系
基因敲入细胞稳转株构建(插入片段<3 kb)
基因敲入小鼠
基因突变载体构建服务
基因组中多个单碱基突变
基于AsCas12a的CRISPRi功能基因组学平台
基于CRISPR/Cas9技术的高通量筛选平台
基于CRISPR/Cas9技术的水稻千粒重基因tgw6突变体的创建
Cas9表达载体,att位点整合载体
Cas9表达载体,P元件转座载体
Cas9表达载体,双整合系统载体
Cas9过表达稳转细胞株
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除