弓形虫热休克蛋白(Hsp90)敲除质粒及过表达质粒,定制服务
弓形虫是一种能在多种宿主细胞内寄生的原虫,对人类和动物健康造成严重威胁。热休克蛋白 90(Hsp90)在弓形虫的生存、发育和应对环境压力等过程中发挥关键作用。
质粒结构
靶向序列:含有与弓形虫 Hsp90 基因特定区域互补的序列。这是实现基因敲除的关键部分,引导基因编辑工具(如 CRISPR - Cas9 系统中的 gRNA)准确地定位到 Hsp90 基因上,使得 Cas9 蛋白能够对靶基因进行切割,或者在同源重组敲除方法中,作为引导序列促使供体 DNA 与靶基因发生同源重组。
选择标记基因:通常包含抗生素抗性基因,如嘌呤霉素抗性基因。在转染弓形虫后,通过在含有相应抗生素的培养基中培养,可以筛选出成功整合了敲除质粒的弓形虫个体。因为只有携带抗性基因的弓形虫才能在含有抗生素的环境中存活和繁殖,这有利于后续对敲除 Hsp90 基因的弓形虫进行富集和鉴定。
复制起始位点和调控元件:为了保证质粒在宿主细胞(如大肠杆菌用于质粒的扩增)和弓形虫细胞中的复制和稳定存在,含有合适的复制起始位点。同时,还可能包括一些转录调控元件,用于控制基因编辑相关元件(如 Cas9 基因或者重组酶基因)的表达,以确保在合适的时间和水平进行基因敲除操作。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
齐岳生物提供的定制服务:
构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统
慢病毒携带shRNA抑制基因表达
慢病毒介导的表达绿色荧光蛋白(GFP)
抑制绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体的构建
利用重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白细胞系
慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞
慢病毒介导BMP一2过表达质粒
哺乳动物细胞慢病毒表达载体
慢病毒V5荧光素酶表达载体
ERα基因shRNAi慢病毒载体的构建
重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白
绿色荧光蛋白和胸苷激酶基因共表达的慢病毒载体的构建
含绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体的构建
慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白
慢病毒介导的shRNA靶向干扰基因表达
大鼠基因RNA干扰慢病毒载体的构建
靶向PRL-3基因的shRNA慢病毒载体的构建
构建慢病毒载体
慢病毒载体质粒
慢病毒载体的骨架质粒合成
构建表达载体(过表达,敲除或者敲低)
基因敲减慢病毒载体感染细胞株
慢病毒制备和导入细胞
慢病毒及稳转细胞构建
RNAi基因敲减细胞系构建服务
MicroRNA抑制表达稳转细胞系构建服务
构建慢病毒表达载体
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除