角蛋白支架联合转化生长因子-β3(TGF-β3)基因过表达载体质粒，定制服务

齐岳生物生物提供基因敲入细胞定制服务，荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等均可实现。我们提供其定制服务，包括多种类型的细胞基因KI和全流程的服务支持。

基因过表达载体质粒的构建

载体选择与元件组成：构建 TGF - β3 基因过表达载体质粒通常选用合适的真核表达载体，如 pcDNA3.1 等。这种载体包含强大的启动子，如 CMV（巨细胞病毒）启动子，能够在多种真核细胞中高效驱动 TGF - β3 基因的转录。同时，载体还配备多克隆位点，方便 TGF - β3 基因的插入，以及氨苄青霉素抗性基因用于在细菌中筛选含有质粒的克隆，确保在质粒扩增过程中有效分离出目标质粒。另外，含有多聚腺苷酸化信号序列，有助于转录产物 mRNA 的稳定，提高 TGF - β3 基因的表达效率。

TGF - β3 基因插入与验证：首先通过基因克隆技术获取 TGF - β3 基因，可从细胞中提取 RNA，反转录为 cDNA 后利用 PCR 扩增得到目的基因片段。然后将 TGF - β3 基因片段插入到载体的多克隆位点，使用 DNA 连接酶进行连接反应。连接产物转化到感受态细菌（如大肠杆菌）中，通过在含有氨苄青霉素的培养基中培养筛选出阳性克隆。对阳性克隆进行提取质粒、酶切鉴定和测序验证，确保 TGF - β3 基因正确插入到载体中并且序列无误。

齐岳生物提供的定制服务：

shRNA基因敲低细胞稳转株

建立shRNA敲低稳转株

小鼠硒蛋白基因敲减shrna慢病毒

构建shRNA表达载体

利用shRNA慢病毒载体构建稳转的细胞系

敲低因表达的shRNA、慢病毒载体构建

质粒构建(基因调取,基因合成,质粒构建,载体构建,亚克隆)

目的基因的亚克隆

亚克隆重组质粒的构建

多转座子载体的构建

亚克隆野生型与张力蛋白在10号染色体同源缺失的磷酸酶(PTEN)基因

PTEN基因亚克隆和pTRE-PTEN反应质粒构建

cDNA片段亚克隆至哺乳动物细胞高表达型穿梭载体中

克隆小鼠趋化因子Fractalkine(FK)基因构建真核表达质粒

shRNA慢病毒质粒的构建

shRNA敲减慢病毒

shRNA敲减细胞株

Cas9过表达稳转细胞株

Six2基因shRNA敲减慢病毒表达载体

小鼠硒蛋白基因shRNA敲减慢病毒重组载体

构建tead4敲减慢病毒载体

构建四环素诱导的YAP1敲减的病毒质粒

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除