刚地弓形虫过氧化物氧化还原酶基因重组真核表达质粒，定制服务

构建重组真核表达质粒的意义：构建刚地弓形虫过氧化物氧化还原酶基因重组真核表达质粒是研究该基因功能的有效手段。通过在真核细胞中表达刚地弓形虫的 Prx 基因，可以深入了解其在寄生虫抗氧化防御机制中的具体作用，以及与宿主细胞之间的相互作用，为开发抗弓形虫药物和疫苗提供新的靶点和思路。

质粒构建过程

基因获取：首先需要从刚地弓形虫中克隆出过氧化物氧化还原酶基因。这可以通过提取刚地弓形虫的总 RNA，然后利用逆转录聚合酶链反应（RT - PCR）技术，以特定的引物进行反转录和 PCR 扩增，得到 Prx 基因的 cDNA 片段。

载体选择与处理：选择合适的真核表达载体，如 pcDNA3.1 等。这种载体通常具有强大的启动子（如 CMV 启动子），能够驱动基因在真核细胞中的高效转录，还包含多克隆位点（MCS）方便基因插入，以及用于筛选的抗生素抗性基因（如氨苄青霉素抗性基因）和保证转录产物稳定的多聚腺苷酸化信号序列。对载体进行限制性内切酶酶切处理，使其在多克隆位点处产生与 Prx 基因片段匹配的黏性末端或平末端。

连接与转化：将获得的 Prx 基因片段与酶切后的载体通过 DNA 连接酶进行连接，构建重组质粒。然后将重组质粒转化到感受态大肠杆菌中，通过在含有相应抗生素（如氨苄青霉素）的培养基中培养，筛选出含有重组质粒的阳性克隆。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

齐岳生物提供的定制服务：

构建N端，C端，N+C端单结构域缺失的截短体质粒

构建CSD（氨基酸39-112）单结构域缺失的截短体质粒

构建ZFD（氨基酸137-176）单结构域缺失的截短体质粒

eGFP-LIN28A敲入的小鼠胚胎干细胞E14细胞系

eGFP-LIN28A过表达小鼠胚胎干细胞E14细胞系

全长人环核苷酸磷酸二酯酶4B2截短突变体(152aa-528aa)

功能域截短体的原核表达质粒

SCIRR 10蛋白截短体真核表达载体

MDM2截短体真核表达载体

猪TRIM56全长及其截短体真核表达质粒的构建

截短型重组质粒的构建

USP22截短质粒构建

METH1基因截短体的构建

小鼠IL-4截短型基因真核表达质粒的构建

构建Tiam1基因的截短体原核表达重组质粒

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除