Tet调控转录因子表达载体 质粒载体,定制服务
Tet 调控转录因子表达载体质粒载体为转录因子。这种特殊的质粒载体构建基于 Tet 调控系统原理。其核心部分是 Tet 响应元件(TRE),位于转录因子编码序列的上游。当没有 Tet 及其衍生物存在时,与之对应的 Tet 调控蛋白(如 TetR 或 rtTA)以特定的方式结合到 TRE 上,阻止转录起始复合物的形成,从而抑制转录因子基因的转录,使转录因子处于低表达或不表达状态。
载体中还包含其他必要元件,如启动子,通常选用较弱的启动子以维持基础转录水平的极低状态。多克隆位点方便将转录因子的编码序列准确插入到 TRE 下游合适位置。转录终止信号确保转录过程的正确终止,抗生素抗性基因则用于在细胞培养过程中筛选出成功转染的细胞。
在细胞实验应用中,将该质粒载体转染到哺乳动物细胞后,在未添加 Tet 相关药物时,细胞内转录因子表达量极低。而当向细胞培养液中加入四环素或强力霉素时,Tet 调控蛋白与药物结合发生构象变化,从 TRE 上解离,使得转录因子基因能够在启动子的驱动下开始转录并翻译出有功能的转录因子蛋白。
这一载体在转录因子功能研究中具有重要意义。它可以精确地控制转录因子在特定时间点的表达激活,有助于研究转录因子在细胞周期调控、细胞分化、细胞应激反应等多种生物学过程中的动态作用机制。
齐岳生物生物自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统,显著提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率,并降低随机插入风险。
定制服务:
eGFP-LIN28A敲入的小鼠胚胎干细胞E14细胞系
ERα基因shRNAi慢病毒载体的构建
ESC或iPSC干细胞点突变
ESC或iPSC干细胞基因敲入
ESC或iPSC干细胞敲除
FGA基因座单碱基突变
GM-CSF融合表达质粒
gRNA和Cas9共表达载体
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2024.04.01