重链和轻链共表达载体,定制服务
重链和轻链共表达载体在抗体生产领域具有极其重要的地位,它为高效制备功能性抗体提供了关键技术支撑。这种载体在设计上整合了多个功能元件以实现重链和轻链基因的协同表达。通常包含强启动子,如 CMV 启动子,可同时驱动重链和轻链基因的转录起始,确保有足够量的 mRNA 生成。在多克隆位点区域,分别设置了适合插入重链和轻链基因序列的特定酶切位点,以便精准地将相应基因克隆入载体。
构建时,先将编码抗体重链和轻链的基因分别通过合适的限制性内切酶处理后,依次插入到对应的多克隆位点。同时,载体还配备有转录终止信号,保障转录过程的正常终止与 mRNA 的稳定性。并且带有抗生素抗性基因,例如新霉素抗性基因,用于在细胞培养过程中筛选出成功转染的细胞。
在哺乳动物细胞表达系统中,如 CHO 细胞或 HEK293 细胞,将重链和轻链共表达载体转染进入细胞后,细胞内的转录和翻译机制会依据载体信息同步合成抗体的重链和轻链。这些链在内质网中进行正确的折叠与组装,最终形成具有完整抗原结合活性的抗体分子并分泌到细胞外。
这种共表达载体的优势显著,相较于分别转染重链和轻链表达载体,它能更好地模拟体内抗体生成过程,提高重链和轻链组装的效率与准确性,从而显著提升抗体的产量和质量。
齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务,包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体(含 Cas9)与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中,在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后,细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复(HDR)实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。
定制服务:
H19过表达质粒(pcDNA3.1-H19)
HBsAg融合表达质粒
HCT116细胞CTNNB1基因定点突变
HCT116细胞敲除NLRP6基因
HCT116细胞系敲除TP53基因
HeLa细胞系敲除NSUN2基因
齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务,包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体(含 Cas9)与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中,在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后,细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复(HDR)实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2024.04.01