Cas9表达载体,双整合系统载体,定制服务
Cas9 表达载体与双整合系统载体的融合为基因编辑技术带来了更强大的功能与的应用前景。这种双整合系统载体通常结合了两种不同的整合机制,例如 att 位点整合与转座子整合等。在载体结构上,一方面具备 att 位点序列以实现精确的位点特异性整合,另一方面含有转座子相关元件,如转座子末端序列,可在转座酶的作用下进行转座整合。在载体内部,有用于驱动 Cas9 表达的启动子,像 CMV 启动子确保 Cas9 有充足的表达,多克隆位点用于插入 gRNA 序列。
构建过程较为复杂,需要将 Cas9 基因、gRNA 克隆位点以及双整合系统的相关元件准确地组装到载体上。在细胞实验中,先将载体转染到细胞内,然后通过添加相应的整合酶和转座酶等,使载体既能利用 att 位点整合的精确性,又能借助转座子整合的高效性,将 Cas9 和 gRNA 序列整合到宿主细胞基因组中。
在基因编辑应用中,双整合系统载体具有诸多优势。在复杂的基因组编辑任务中,它可以提高整合效率,确保 Cas9 系统在细胞内的稳定表达。例如在构建多基因编辑的细胞模型时,能够更快速、更可靠地将多个 Cas9/gRNA 组件整合到基因组不同位置,实现对多个基因的同步编辑。
齐岳生物生物自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统,显著提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率,并降低随机插入风险。
定制服务:
基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除
基于CRISPR/Cas9技术构建严重联合免疫缺陷小鼠
基于CRISPR/Cas9技术基因敲除动物
基于CRISPRCas9技术的基因敲入敲除策略
基于CRISPR-Cas9技术构建大肠杆菌基因敲除菌株
基于CRISPR-Cas的基因编辑技术
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2024.04.01