gRNA和Cas9共表达载体,定制服务
gRNA 和 Cas9 共表达载体是植物 CRISPR 基因编辑技术的核心载体,在实现植物基因编辑过程中发挥着关键作用。这种载体整合了多个关键元件以确保 gRNA 和 Cas9 的协同表达。启动子的选择是关键环节,对于 Cas9 表达,常采用强启动子如 CaMV 35S 或 Ubiquitin 启动子,以保证在植物细胞中有足够量的 Cas9 蛋白合成。而对于 gRNA 表达,U6 启动子以其在驱动小 RNA 转录方面的高效性和特异性而被广泛应用。多克隆位点方便插入不同的 gRNA 序列,从而能够针对不同的植物靶基因进行编辑。
在构建时,先将 Cas9 基因克隆到载体的合适位置,然后把设计好的 gRNA 序列插入到对应的多克隆位点。构建好的共表达载体可通过多种转化方法导入植物细胞,例如农杆菌介导的转化,利用农杆菌将载体携带进植物细胞并整合到植物基因组中;或者采用基因枪转化,将包裹有载体的微小颗粒高速射入植物细胞。
转染后的植物细胞内,在启动子的驱动下,Cas9 和 gRNA 同时被合成。gRNA 迅速与 Cas9 结合并引导其定位到靶 DNA 位点,Cas9 切割 DNA 产生双链断裂,随后植物细胞启动修复机制,在修复过程中可能产生基因突变,实现对植物基因的编辑。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
定制服务:
利用CRISPR/Cas9技术制备基因敲除鼠
利用CRISPR/Cas9系统对基因定点突变
利用CRISPR-Cas9技术构建基因敲除小鼠胚胎干细胞系
利用CRISPR-Cas9技术构建微小核糖核酸-551b基因敲除小鼠模型
利用shRNA慢病毒敲降小鼠基因
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2024.04.01