shRNA载体构建,定制服务
shRNA 载体构建在植物基因沉默研究领域具有极为重要的意义,是探究植物基因功能以及调控植物基因表达的有效手段。构建 shRNA 载体首先需要设计合适的 shRNA 序列,该序列通常基于目标基因的序列信息设计,长度一般在 19 - 23 个核苷酸左右,且能与靶 mRNA 特异性互补配对。然后选择合适的载体骨架,常见的植物 shRNA 载体包含启动子,如 U6 启动子,其可高效驱动 shRNA 的转录。多克隆位点则用于插入设计好的 shRNA 序列。
在构建过程中,先利用合成的 shRNA 序列构建成 shRNA 表达盒,然后通过限制性内切酶将表达盒插入到载体的多克隆位点中,形成重组 shRNA 载体。之后将重组载体转化进大肠杆菌中进行扩增和保存。
在植物实验中,通过农杆菌介导转化或基因枪转化等方法将 shRNA 载体导入植物细胞。导入后,在植物细胞内,启动子驱动 shRNA 转录生成,shRNA 会在细胞内的核酸酶作用下被加工成具有活性的 siRNA 样分子,这些分子能够与靶 mRNA 特异性互补配对结合,通过抑制 mRNA 的翻译过程或者促使其降解,从而降低靶基因的表达水平。
齐岳生物生物提供基因敲入细胞定制服务,荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等均可实现。我们提供其定制服务,包括多种类型的细胞基因KI和全流程的服务支持。
定制服务:
绿色荧光蛋白和胸苷激酶基因共表达的慢病毒载体的构建
麦胚凝集素(WGA)慢病毒载体的构建
慢病毒V5荧光素酶表达载体
慢病毒YKO系列载体
慢病毒构建的短发夹核糖核酸(shRNA)激酶文库
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2024.04.01