通过慢病毒介导的基因过表达，定制服务，实验步骤

慢病毒载体（ Lentiviral vector, LVs ）是在 HIV-1 病毒基础上改造而成的病毒载体系统，它能高效的将目的基因（或 RNAi ）导入动物和人的原代细胞或细胞系。慢病毒载体基因组是正链 RNA ，其基因组进入细胞质后，被自身携带的反转录酶反转录为DNA ，再进入到细胞核并整合到细胞基因组中。整合后的 DNA 转录 mRNA ，回到细胞质中，表达目的蛋白；或产生 RNAi 干扰。

慢病毒包装的实验步骤：

（1）构建含有目的基因的慢病毒载体。

（2）大量扩增慢病毒载体：根据实验将包装慢病毒过程中需要用到的3个质粒进行纯度无内毒素抽提。

（3）293T细胞内进行慢病毒载体的大量包装：按一定比例将转移质粒、包装质粒和包膜质粒共转染指数生长期的293T细胞。

（4）慢病毒的浓缩及纯化：PEG8000浓缩法/蔗糖密度梯度超速离心法。

（5）慢病毒滴度测定：采用GFP荧光计数、绝对定量qPCR和RT-qPCR等进行慢病毒滴度测定。

通过慢病毒介导的基因过表达定制服务

慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠T淋巴细胞中的表达

构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统

慢病毒携带shRNA抑制基因表达

慢病毒介导的表达绿色荧光蛋白(GFP)

抑制绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体的构建

利用重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白细胞系

慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞

慢病毒介导BMP一2过表达质粒

哺乳动物细胞慢病毒表达载体

慢病毒V5荧光素酶表达载体

ERα基因shRNAi慢病毒载体的构建

重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白

绿色荧光蛋白和胸苷激酶基因共表达的慢病毒载体的构建

含绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体的构建

慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白

慢病毒介导的shRNA靶向干扰基因表达

大鼠基因RNA干扰慢病毒载体的构建

靶向PRL-3基因的shRNA慢病毒载体的构建

构建慢病毒载体

慢病毒载体质粒

慢病毒载体的骨架质粒合成

构建表达载体(过表达,敲除或者敲低)

基因敲减慢病毒载体感染细胞株

慢病毒制备和导入细胞

慢病毒及稳转细胞构建

RNAi基因敲减细胞系构建服务

MicroRNA抑制表达稳转细胞系构建服务

构建慢病毒表达载体

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

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