慢病毒载体的来源及结构,构建慢病毒表达载体
慢病毒载体的来源
慢病毒属(lentivirus)在分类上属于逆转录病毒科,包括8种能够感染人和脊椎动物的病毒,原发感染的细胞以淋巴和巨噬细胞为主,导致感染个体发病。
慢病毒载体的结构
1)野生型HIV-1的基因结构
作为慢病毒载体的改造基础,我们首先了解一下野生型HIV-1的基因结构。HIV-1病毒基因组是由两条正链的RNA组成,长度约为9Kb左右,两端是长末端重复序列(LTR),两个LTR之间的序列为编码蛋白的序列,由9个基因所构成(图2)。
◆ 编码三种主要病毒结构蛋白的基因:gag、pol和env。gag基因编码病毒的核心蛋白如核衣壳蛋白、内膜蛋白和衣壳蛋白;pol基因编码病毒复制相关的酶;env基因编码病毒包膜糖蛋白。
◆ 编码两个调节蛋白的基因:tat、rev。rev主要参与蛋白调节的表达水平,tat参与蛋白转录的控制,与病毒的长末端重复序列(long terminalrepeats,LTRS)结合后促进病毒的所有基因的转录。
◆ 编码四个辅助蛋白的基因:vif、vpr、vpu、nef。在HIV-1的基因组结构上,还含有病毒生命史所需要的其他序列结构,例如病毒复制和包装等所需要的信号等。
定制服务:
哺乳动物抗体表达载体 PiggyBac转座载体
哺乳动物抗体表达载体 Tol2转座载体
shRNA打靶效率检测载体
shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体(表达含打靶位点的报告基因)
shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体(表达shRNA和含有打靶位点的报告基因)
哺乳动物CRISPR基因编辑载体
gRNA和Cas9共表达载体 质粒载体
gRNA和Cas9共表达载体 慢病毒载体
gRNA和Cas9共表达载体 腺病毒载体
gRNA和Cas9共表达载体 AAV病毒载体(表达单SagRNA)
gRNA和Cas9共表达载体 PiggyBac转座载体
哺乳动物CRISPR基因表达调控载体
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
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