点突变细胞模型构建,定点切割DNA/同源重组修复DNA/阳性细胞筛选
构建细胞点突变模型的理论基础是基因的同源重组修复。当细胞基因组DNA双链由于外部因素而断裂时,细胞中存在着一种DNA修复机制就会被激发,对断裂位点的DNA双链进行修复,根据修复方式的不同可分为同源重组修复和非同源重组修复。顾名思义,同源重组是指DNA在修复的过程中以同源的DNA序列作为模板完美修复,而非同源重组修复是指细胞内的相关蛋白直接将断裂的DNA两端重新连起来,同时可能会随机引入新的碱基。根据这个理论基础,点突变细胞系的构建分为三个部分:
下图表示使用定点诱变将2个新的错义变体引入含有野生型ALDH5A1 cDNA 19的pAD1/RSV载体中。通过蛋白质印迹和逆转录PCR(RT-PCR)确认HEK293细胞中2个错义琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)等位基因的成功转染。
定制服务
点突变细胞构建
构建定点突变疾病模型
修复细胞基因中的突变
质粒点突变
点突变质粒
定点突变服务
单一突变服务
突变文库服务
哺乳动物细胞点突变
ESC或iPSC干细胞点突变
RNP法点突变
先导编辑点突变
单点、多点突变(替换、插入、删除或截断)或随机突变
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。如有侵权,可联系我们删除