FITC-Vanco荧光标记万古霉素/粘杆菌素A方法
发布时间:2025-02-10     作者:WYQ   分享到:
FITC-Vanco,即荧光素异硫氰酸酯标记万古霉素,是一种将荧光素(FITC)与万古霉素(Vanco)结合的荧光探针,主要用于生物医学研究中的荧光成像和抗生素敏感性测试。其标记方法通常涉及以下步骤:
万古霉素的准备:确保万古霉素的纯度和稳定性,可以从商业供应商处获得高纯度的万古霉素。
FITC的溶解:将FITC溶解在适当的缓冲液(如PBS或碳酸盐缓冲液)中,以确保其稳定性和反应活性。
标记反应:将FITC与万古霉素混合,在适宜的pH(约为9.0)和温度下进行反应,以促进FITC与万古霉素的结合。FITC的异硫氰酸基团能够与万古霉素中的氨基酸残基(如赖氨酸的氨基)发生反应,形成稳定的共价结合。反应时间通常为数小时,以确保标记的完全进行。
纯化与鉴定:通过透析、离心或色谱等方法去除未结合的FITC,得到标记的万古霉素。随后,使用UV-Vis光谱、荧光光谱、HPLC、质谱和生物活性测试等技术对标记的效率和特性进行表征,以确保标记的成功。
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