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荧光素标记叶酸,FITC-FA,制备流程
发布时间:2025-02-27     作者:axc   分享到:

荧光素标记叶酸,FITC-FA,制备流程

FITC-FA 的合成需通过化学偶联反应将异硫氰酸荧光素(FITC)与叶酸(FA)结合,具体步骤如下:

叶酸活化:叶酸分子的羧基(-COOH)需预先活化以增强反应活性。通常采用碳二亚胺类缩合剂(如 EDC/NHS)处理,形成活泼的 N - 羟基琥珀酰亚胺酯(FA-NHS)中间体。

FITC 偶联:将活化的叶酸与 FITC 在碱性条件(pH 8-9)下反应。FITC 的异硫氰酸酯基团(-NCS)与叶酸的氨基(-NH₂)或活化酯基团反应,形成稳定的硫脲键(-NH-CO-NH-)。

产物纯化:通过透析(MWCO 3.5 kDa)或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的 FITC 和副产物,冻干得到 FITC-FA 纯品。

表征验证:利用 UV-Vis 光谱(FITC 特征吸收峰~495 nm)、荧光光谱(发射峰~520 nm)及质谱确认偶联成功,并计算标记率(通常为 1-5 mol FITC/mol FA)。

组成与结构

FITC-FA 的分子结构包含以下关键部分:

叶酸(FA):由蝶啶环、对氨基苯甲酸(PABA)和谷氨酸侧链组成。其核心作用是通过与叶酸受体(FR)的高亲和力(Kd ~10⁻¹⁰ M)靶向递送药物至肿瘤细胞。

荧光素(FITC):异硫氰酸荧光素的母体结构为氧杂蒽酮,含共轭双键体系,赋予其绿色荧光特性。FITC 通过硫脲键连接至叶酸的氨基(如谷氨酸侧链的 ε- 氨基)。

连接臂:若存在,通常为短链烷基(如 -CH₂CH₂-)或聚乙二醇(PEG),用于调节水溶性和空间位阻,避免叶酸与 FITC 相互干扰。

电荷与亲水性:叶酸的羧酸根(-COO⁻)和 FITC 的磺酸基(-SO₃⁻)赋予整体分子亲水性,适合水性生物环境。

名称:荧光素标记叶酸,FITC-FA

纯度:95%+

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家 :齐岳生物

荧光素标记叶酸,FITC-FA

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用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

保存:冷藏

以上产品来源于齐岳生物axcAXC.2025.02.25


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