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产品名称:FITC-PEOz-N₃;荧光素异硫氰酸酯-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-叠氮化物
1. 结构设计
FITC(荧光标记):
荧光素异硫氰酸酯(FITC),提供绿色荧光(λ_ex~495 nm,λ_em~525 nm),用于成像、示踪或定量分析。
PEOz(亲水间隔臂):
抗蛋白吸附的聚(2-乙基-2-噁唑啉),作为柔性链段隔离FITC与N₃,减少空间位阻和荧光淬灭。
N₃(点击化学基团):
叠氮基团(-N₃),通过无铜点击化学(如SPAAC)或铜催化叠氮-炔环加成(CuAAC)与炔烃、环辛炔等反应,用于偶联生物分子(如抗体、药物、纳米材料)。
2. 合成策略
双端修饰法:
步骤1:通过阳离子开环聚合合成PEOz-N₃(如使用叠氮化钠取代PEOz-OTs)。
步骤2:将FITC的异硫氰酸酯基团与PEOz末端的氨基反应(pH 8-9,避光),形成FITC-PEOz-N₃。
保护-脱保护法:
步骤1:合成PEOz-NH₂(氨基末端)。
步骤2:通过Boc保护部分氨基,与FITC反应后脱保护。
步骤3:剩余氨基转化为叠氮基团(如通过重氮化反应)。
3. 关键性质
光学性能:
FITC荧光强度受PEOz链长影响(短链保留亮度,长链可能淬灭)。
反应活性:
N₃在生理条件下稳定,可通过SPAAC(无需催化剂)或CuAAC高效反应。
抗污性:
PEOz链屏蔽FITC和N₃,减少非特异性蛋白吸附。
生物相容性:
PEOz通过FDA认证,FITC和N₃常用生物标记试剂。
4. 表征与优化方向
结构验证:
NMR:确认PEOz链长、FITC/N₃接枝率及位置。
UV-Vis:定量FITC标记密度(λ_abs~495 nm)。
IR/Raman:检测N₃特征峰(~2100 cm⁻¹)。
性能评估:
荧光量子产率:比较自由FITC与FITC-PEOz-N₃的亮度。
点击反应效率:通过HPLC或荧光标记检测环加成产率。
血清稳定性:验证PEOz抗污性对荧光信号的维持作用。
挑战与优化:
链长调控:平衡PEOz亲水性与FITC荧光强度(推荐DP=20-50)。
正交修饰:确保FITC和N₃分别修饰在PEOz两端(需保护-脱保护策略)。
储存条件:避光低温保存,防止FITC光漂白及N₃缓慢分解。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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