125I放射同位素标记单克隆抗体技术说明

125I标记单克隆抗体技术

同位素标记是一种重要的抗体标记技术，牨977年Yalow等在放射免疫测定法所作突出贡献而获得医学和生理学 诺贝尔奖。McAb标记同位素后除应用于放射免疫测定外，还可用于竞争结合试验、体内**定位等。

(一)　原理

氯胺桾即对甲苯碘氯胺钠，在水溶液中生成次氯酸，为一种温和氧化剂，当加入到有蛋白质和碘的弱碱水溶液中，可将I2氧化为I+并结合到氨基酸上。如标记条件温和，标记后的McAb仍具有良好的结合活性，通过放射性同位素强度的测定可反映相应抗原 的含量。

(二)　方法

　　　　　　在细胞冻存管内加入纯化的McAb100μg／100μl，

　　　　　　再加入10μl 0.05M磷酸缓冲液

　　　　　　再加入10μl(含1mCi)125I

　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入10μl氯胺-T(5mg／ml溶于0.05M

　　　　　　磷酸盐缓冲液)，孵育时间不超过30秒

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入100μl偏重亚硫酸钠(1.2mg／ml溶于

　　　　　　0.05M磷酸缓冲液 )

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入200μl　KI溶液(少许结晶KI溶于0.05M

　　　　　　磷酸缓冲液＋4％牛血清白蛋白)

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　用PD10柱(Sephadex G25)除去游离125I

　　　　　　用4％BSA　PBS洗脱

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　分部收集，0.5ml／管

　　每管取5μl进行γ计数，计算标记抗体的比活性和标记率

　　　　　　　　　　　结合于McAb１２５I放射性强度(cpm)

　　　　标记率(％)＝───────────────────

　　　　　　　　　　　　　　总放射性强度(cpm)

　　　　　　　　　　　　　　　　结合于某一管McAb上的放射性强度

　　　　比活性(μCi／μgMcAb)＝────────────────

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　某一管McAb总量

(三)　试剂器材

1.　纯化后的McAb

2.　0.05M磷酸缓冲液，氯胺桾，偏重亚硫酸钠，KI，BSA

3.　125I

4.　有通风装置的超净台，γ计数仪

5.　PD10柱(Sephadex G25)

(四)　注意事项

1.　严防同位素污染，工作人员必须穿着工作衣，戴口罩、帽子、手套。必须在严密的通风橱或通风超净台中操作。操作前后对实验室环境进行监测。所用125I和标记物应妥善保管。

2.　如标记细胞因子、激素等，应选用更温和的标记方法，使保持更好的生物学活性。

齐岳可供应产品定制服务：

125l同位素    

125l放射同位素标记标记小分子化合物    

125l放射同位素标记标记抗体    

125l放射同位素标记纳米粒子    

125l放射同位素标记大分子化合物    

125l放射同位素标记标记生物蛋白    

125l放射同位素标记多肽    

125l放射同位素标记前体化合物    

氟-18放射同位素标记生物活性分子    

125l放射同位素标记医药    

125l放射同位素标记常规活性基团    

125l放射同位素标记特殊活性基团    

125l放射同位素标记荧光素    

125l放射同位素标记磷脂    

125l放射同位素标记高分子聚合物    

125l放射同位素标记共聚物    

125l放射同位素标记牛血清白蛋白    

125l放射同位素标记人血清白蛋白    

125l放射同位素标记转铁蛋白    

125l放射同位素标记小麦胚凝集素    

125l放射同位素标记链霉亲和素    

125l放射同位素标记肝素    

125l放射同位素标记刀豆球蛋白    

125l放射同位素标记过氧化氢酶    

125l放射同位素标记胰岛素    

125l放射同位素标记络蛋白    

125l放射同位素标记卵清蛋白    

125l放射同位素标记凝集素    

125l放射同位素标记葡聚糖    

125l放射同位素标记半乳糖化壳聚糖化合物    

125l放射同位素标记右旋糖酐    

125l放射同位素标记溶菌酶    

125l放射同位素标记海藻酸钠    

125l放射同位素标记壳聚糖    

125l放射同位素标记半乳糖    

125l放射同位素标记甘露糖    

125l放射同位素标记葡萄糖    

125l放射同位素标记乳糖基    

125l放射同位素标记黄原胶    

125l放射同位素标记岩藻多糖    

125l放射同位素标记木聚糖    

125l放射同位素标记纤维二糖    

125l放射同位素标记香菇多糖    

125l放射同位素标记硫酸软骨素    

125l放射同位素标记辣根过氧化氢酶    

125l放射同位素标记**或小分子    

125l放射同位素标记甲氨蝶呤    

125l放射同位素标记紫杉醇    

125l放射同位素标记阿霉素    

125l放射同位素标记顺铂    

125l放射同位素标记环丙沙星    

125l放射同位素标记甲硝唑    

125l放射同位素标记雷替曲塞    

125l放射同位素标记培美曲塞    

125l放射同位素标记磺胺地索辛    

125l放射同位素标记茴香酰胺    

125l放射同位素标记雌性激素    

125l放射同位素标记金刚烷    

125l放射同位素标记阿奇霉素    

125l放射同位素标记氮川三乙酸-镍    

125l放射同位素标记多肽RGD    

125l放射同位素标记cRGD    

125l放射同位素标记Angiopep    

125l放射同位素标记TAT    

125l放射同位素标记Octreotide    

125l放射同位素标记SP94    

125l放射同位素标记CPP    

125l放射同位素标记CTT2    

125l放射同位素标记CCK8    

125l放射同位素标记GEII    

125l放射同位素标记RVG29    

125l放射同位素标记YIGSR    

125l放射同位素标记WSW ( WSWGPYSC)    

125l放射同位素标记Pep-1 (CGEMGWVRC)    

125l放射同位素标记RVG29MMPs(GGGGCTTHWGFTLC)    

125l放射同位素标记NGR    

125l放射同位素标记R8    

125l放射同位素标记氨基酸    

125l放射同位素标记聚氨基酸    

125l放射同位素标记聚赖氨酸    

125l放射同位素标记聚鸟氨酸    

125l放射同位素标记聚精氨酸    

125l放射同位素标记聚肌氨酸    

125l放射同位素标记聚天冬氨酸    

125l放射同位素标记聚谷氨酸    

125l放射同位素标记组氨酸    

125l放射同位素标记谷氨酸    

125l放射同位素标记赖氨酸    

125l放射同位素标记苏氨酸    

125l放射同位素标记亮氨酸    

125l放射同位素标记缬氨酸    

125l放射同位素标记色氨酸    

125l放射同位素标记精氨酸    

125l放射同位素标记鸟氨酸    

125l放射同位素标记天冬氨酸    

125l放射同位素标记络氨酸    

125l放射同位素标记甘氨酸    

125l放射同位素标记丝氨酸    

上述产品定制仅用于科研，不可用于人体实验!

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