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产品名称：CY5.5-Chondroitin Sulfate，荧光标记糖类

1. 材料特性与标记策略

（1）硫酸软骨素的结构与功能

化学组成：由重复的二糖单元（N-乙酰半乳糖胺 + 葡萄糖醛酸）组成，含硫酸酯基（约10-15%单糖残基硫酸化），分子量10-100 kDa。

生物活性：

关节润滑：与透明质酸协同形成软骨基质。

信号调控：结合FGF、VEGF等生长因子，参与血管生成和伤口愈合。

电荷特性：高负电性（每二糖单元带2-3个负电荷）赋予强亲水性和阳离子分子结合能力。

（2）CY5.5标记策略

光谱适配：发射波长~680-700 nm，适合活体成像（组织穿透深度>5 mm）。

标记方法：

羧基活化法：

EDC/NHS化学：活化葡萄糖醛酸羧基，与CY5.5-胺反应（pH 5.5-6.5）。

氨基修饰法：

脱乙酰化处理：部分去除N-乙酰基暴露氨基，与CY5.5-NHS反应（需控制脱乙酰度）。

氧化还原法：

高碘酸盐氧化：在二糖单元邻二醇处引入醛基，与CY5.5-肼反应（需还原步骤稳定席夫碱）。

2. 制备与优化

（1）CY5.5-Chondroitin Sulfate制备流程

材料准备：

硫酸软骨素溶解于MES缓冲液（pH 6.0，50 mM，含0.15 M NaCl）。

CY5.5-胺溶解于DMSO（浓度≤1 mM，避光）。

活化与偶联：

加入EDC（2 mM）和NHS（5 mM），室温活化30 min。

加入CY5.5-胺（硫酸软骨素:CY5.5摩尔比=1:3），避光反应4 h。

纯化与表征：

透析：使用3.5 kDa MWCO透析袋去除未反应染料（PBS，4℃）。

标记效率：通过荧光分光光度法测定（λex=675 nm，λem=695 nm）。

分子量验证：HPLC-SEC或琼脂糖凝胶电泳确认标记后完整性。

（2）关键优化参数

pH控制：羧基活化推荐pH 6.0（平衡活化效率与硫酸软骨素稳定性）。

离子强度：添加NaCl（0.15-0.3 M）屏蔽静电排斥，提升标记效率。

温度与时间：低温（4℃）延长反应时间至6 h，减少副反应。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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