化学结构与性质
Transferrin-RB是一种将罗丹明(Rhodamine B,RB)与转铁蛋白(Transferrin)结合的荧光标记蛋白。罗丹明B是一种常用的红色荧光染料,其吸收波长约为550 nm,发射波长约为570 nm,广泛用于荧光显微镜成像和流式细胞术。转铁蛋白是一种在血液中负责铁离子运输的糖蛋白,能够特异性结合铁离子并将其运输到细胞内。结合了罗丹明B的转铁蛋白不仅保留了其铁离子运输功能,还增加了荧光标记功能,使其在生物成像和细胞生物学研究中具有独特的优势。
合成方法
Transferrin-RB的合成通常通过将罗丹明B与转铁蛋白进行化学偶联实现。罗丹明B具有活性的羧基(-COOH),能够与转铁蛋白中的氨基(-NH2)发生缩合反应,形成稳定的共价键。具体步骤如下:
溶解罗丹明B:将罗丹明B溶解在适当的有机溶剂(如二甲基亚砜,DMSO)中。
混合反应:将溶解后的罗丹明B与转铁蛋白混合,在温和的条件下(如室温、pH 7.4的缓冲溶液)进行反应。
纯化:反应完成后,通过透析或凝胶过滤等方法去除未反应的罗丹明B,得到纯化的Transferrin-RB。
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