Streptavidin-HRP 是一种通过化学方法将辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)共价连接到链霉亲和素(Streptavidin)上的生物偶联物。链霉亲和素是一种从链霉菌中提取的蛋白质,具有高的亲和力,能够特异性地结合生物素(Biotin)。HRP是一种常用的酶标记物,广泛用于免疫组化和酶联免疫吸附测定(ELISA)等实验中。
合成方法
HRP通过其氨基(-NH₂)与链霉亲和素上的羧基(-COOH)发生酰胺化反应,形成稳定的共价键。反应通常在温和的条件下进行,使用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作为偶联试剂。反应完成后,通过透析或凝胶过滤纯化产物,去除未反应的HRP和副产物。
应用
Streptavidin-HRP广泛应用于生物医学研究。在免疫组化中,它可用于标记细胞表面的生物素化受体,通过显色反应观察其分布和动态变化。在ELISA实验中,Streptavidin-HRP可用于检测生物素标记的抗原或抗体,实现高灵敏度的检测。此外,Streptavidin-HRP还可用于开发生物传感器,检测生物分子的相互作用或环境变化。
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