Cy3-链霉亲和素,Cy3-Streptavidin,荧光素Cy5/Cy3/ICG标记链霉亲和素
Cy3-链霉亲和素是一种红色荧光标记的链霉亲和素(Streptavidin),利用 Cy3(Cyanine 3)染料对其进行共价修饰,赋予其荧光特性。链霉亲和素具有极强的生物素(Biotin)结合能力,因此 Cy3-链霉亲和素用于荧光成像、生物标记和免疫检测等实验中。
反应条件
蛋白修饰
采用 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)或马来酰亚胺(Mal)活化的 Cy3 染料,可与链霉亲和素上的伯胺(NHS 反应)或巯基(Mal 反应)共价结合。
反应缓冲体系一般使用 pH 7.2~7.5 的 PBS 缓冲液,以保证蛋白质的活性。
荧光染料的共价偶联
若采用 Cy3-NHS,需使用 1.5-3 倍摩尔过量的 Cy3-NHS 与链霉亲和素反应,反应温度控制在 4°C25°C,时间 14 小时。
若采用 Cy3-马来酰亚胺(Cy3-Mal),则链霉亲和素表面的巯基(-SH)可与马来酰亚胺基团进行 Michael 加成反应,pH 应维持在 6.5~7.0,以避免马来酰亚胺基团水解。
纯化
反应完成后,通过凝胶过滤柱(如 Sephadex G-25)去除未结合的染料,以确保荧光标记的链霉亲和素具有良好的荧光性能和特异性。
表征
采用紫外-可见光光谱(UV-Vis)和荧光光谱检测 Cy3-链霉亲和素的标记率,并通过 SDS-PAGE 电泳分析其纯度。
Cy3-链霉亲和素应用于荧光共聚焦显微镜(FCM)、流式细胞术(FACS)和生物传感器等研究领域。
产品名称:
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.03.04